[发明专利]制备治疗用途的脂质体封装式长春新碱的改进方法

说明书

相关申请

本申请要求2012年11月20日提交的名为“制备治疗用途的脂质体封装式长春新碱的改进方法(Improved Method for the Preparation of Liposome Encapsulated Vincristine for Therapeutic Use)”的美国临时申请号61/728378的优先权，其全部内容被并入本文作为参考。

发明背景

脂质体是确立的可通过相对于非封装形式提高药物的等离子体分布和药代动力学来增强治疗活性药物效力的纳米颗粒(例如，Weinstein,Liposomes:From Biophysics to Therapeutics,(Ostro,M.J.,ed.),Marcel Dekker,Inc.,N.Y.,pp.277-338,(1987))。例如，硫酸长春新碱脂质体注射液(VSLI)是封装在鞘磷脂-胆固醇脂质体中的抗癌治疗硫酸长春新碱的脂质体制剂，其提供的效力大于标准硫酸长春新碱注射液USP(VSI)。临床试验也已证明VSLI通过与非封装式长春新碱相比显著延长长春新碱的循环半衰期而促进剂量强化。脂质体提供延迟药物释放机制，并且脂质体尺寸能使药物通过外渗在癌组织中积累((Webb等,Cancer Chemother.Pharmacol 42:461-470,1998；Shan等,Cancer Chemother.Pharmacol 58:245-255,2006)。这些特征转化成相对于标准VSI提高的临床效益。

硫酸长春新碱在鞘磷脂-胆固醇脂质体中的封装一般通过利用酸性脂质体内pH(例如，pH 4)和中性pH(例如，pH 7)的外部介质来实现。这种pH梯度使弱碱性长春新碱以高效率扩散到脂质体内部中(Cullis等，Trends in Biotech 9:268-272，1991；Boman等，Bioch Biophys Acta，1152:253-258，1993)。为使长春新碱在跨膜pH梯度下在脂质体内部中积累，脂质体膜必须对于长春新碱的空间体积是暂时可渗透的。因此，不同于通常可被动地封装到脂质体中的中性或阴离子药物，必须增加鞘磷脂-胆固醇脂质体的温度以使跨膜pH梯度关于长春新碱起作用。脂质体双层，是联锁鞘磷脂和胆固醇分子的取向，需要特殊的瞬态热模式来产生向热性紊乱过渡态(thermotropic disorder transition states)。这些过渡态显著减轻膜脂质之间的弱分子间结合，在联锁脂质中产生间隙，并使脂质体生物层变得暂时可渗透。封装过程利用在冷却回到环境温度时发生的鞘磷脂-胆固醇脂质的自发性重新自组装，恢复了膜完整性。

这种药物封装加热曲线必须与长春新碱对于热暴露的化学不稳定性平衡(Vendrig等，Internatl.J.of Pharmaceutics 50:189-196，1989；Sethi等，Cancer Res。45:5386-5389，1985)。长春新碱是热不稳定的，并且容易在升高的温度下降解成N-脱甲酰基长春新碱。长春新碱的这种甲酰胺水解是公知的降解途径，并且影响硫酸长春新碱注射液(VLSI)的稳定保质期。例如，VLSI溶液由于这种热不稳定性不能被热灭菌，必须在冷藏温度下储存和运送以实现延长的稳定性。

因此，当前硫酸长春新碱脂质体注射液(VSLI)根据FDA批准的标签(www.accessdata.fda.gov；参考ID:3172211，2012)上提供的指导在药房由单独的组分制备。这些指导包括加热程序——需要使用水浴以实现长春新碱在鞘磷脂-胆固醇脂质体中的有效封装和保持长春新碱的化学纯度。水的良好传热性质允许大于95％的长春新碱封装，而无可观的药物化学降解。

由于VSLI是可注射药物，组分的生产和药房制备被严格控制以保持无菌。因此，VSLI制备过程中的开放水浴的使用需要另外的物力、规划和设备(例如，浮动环)，包括保持无菌环境的无菌罩或“洁净”间。在一些药房中，VSLI的配成由于保持无菌环境的限制而无法完成。

因此，仍需要可有效且可再现地进行而不需当前所需的另外的物力和设备的制备VSLI的改进方法。

发明概述

本发明至少部分基于避免在封装过程中使用加热水浴的需求的制备VSLI的方法的建立。因此，本发明提供有效的、可再现的制备VSLI的方法，其可广泛应用，并具有预料不到的简便性和减少的污染危险。