[发明专利]细胞制备方法

权利要求书

1.一种制备冷冻保存的人肝细胞的不用离心的方法，所述人肝细胞由来自多个个体的肝细胞组成，所述方法包括：

a)在针对多个个体各自分开的器皿内冷冻保存肝细胞悬液中来自所述多个个体的肝脏的肝细胞；

b)使来自多个个体的所述肝细胞悬液的分开的器皿在37℃水浴中解冻直至所述肝细胞悬液达到4℃的温度，仅至所述肝细胞悬液中的冰晶刚刚消失为止，并使所述肝细胞悬液维持在4℃的温度；

c)将所述分开的器皿的来自多个个体的肝细胞悬液汇集在一个容器中，其中，该汇集的肝细胞悬液维持在4℃的温度；

d)将汇集的肝细胞悬液分配进入多个器皿；和

e)将汇集的肝细胞悬液的多个器皿冷冻保存，其中，步骤b)、c)、d)和e)的进行不用稀释或更换所述肝细胞悬液；

其中，所述肝细胞悬液包含冷冻保护剂。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述冷冻保护剂包含Dulbecco改良型伊格尔培养基：补充有10％胎牛血清和10％二甲亚砜(DMSO)的营养混合物F-12(DMEM/F12)培养基。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述肝细胞的冷冻保存包括以-1℃/分钟的速率冷冻保存所述肝细胞至-70℃。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括在冷冻贮存系统中贮存所述冷冻保存的汇集的肝细胞。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述肝细胞的贮存包括在-150℃或更低的温度下贮存。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括从多个个体的肝脏分离肝细胞。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括解冻所述冷冻保存的汇集的肝细胞用于实验。