[发明专利]新重组因子C、其制造方法、及内毒素的测定法

权利要求书

1.一种鲎的因子C，其具有因子C的活性。

2.根据权利要求1所述的因子C，其为重组蛋白。

3.根据权利要求1或2所述的因子C，其具有(α-2,3)键的末端唾液酸。

4.根据权利要求3所述的因子C，其与天然因子C相比具有较多的(α-2,3)键的末端唾液酸。

5.根据权利要求3或4所述的因子C，其与将Sf9用作宿主细胞所表达的鲎的因子C相比，具有较多的(α-2,3)键的末端唾液酸。

6.根据权利要求1～5中任一项所述的因子C，其在21mM的柠檬酸钠的存在下显示出10％以上的残留活性。

7.根据权利要求1～6中任一项所述的因子C，其在非还原SDS-PAGE中测定的分子量为115kDa～140kDa。

8.根据权利要求7所述的因子C，其在非还原SDS-PAGE中测定的分子量为127kDa±5kDa。

9.根据权利要求1～8中任一项所述的因子C，其为下述(A)、(B)、(C)、或(D)所示的蛋白质：

(A)包含序列号2所示的氨基酸序列的蛋白质；

(B)包含在序列号2所示的氨基酸序列中含有一个或几个氨基酸的置换、缺失、插入或添加的氨基酸序列、且具有因子C的活性的蛋白质；

(C)包含序列号4所示的氨基酸序列的蛋白质；

(D)包含在序列号4所示的氨基酸序列中含有一个或几个氨基酸的置换、缺失、插入或添加的氨基酸序列、且具有因子C的活性的蛋白质。

10.根据权利要求1～8中任一项所述的因子C，其为下述(A)或(B)所示的蛋白质：

(A)包含序列号2所示的氨基酸序列的蛋白质；

(B)包含在序列号2所示的氨基酸序列中含有一个或几个氨基酸的置换、缺失、插入或添加的氨基酸序列、且具有因子C的活性的蛋白质。

11.根据权利要求1～10中任一项所述的因子C，其为水溶性。

12.一种制造鲎的因子C的方法，该方法包括将哺乳类细胞用作宿主细胞而表达鲎的因子C。

13.根据权利要求12所述的方法，其中，所述哺乳类细胞为COS-1以外的哺乳类细胞。

14.根据权利要求12所述的方法，其中，所述哺乳类细胞为选自由除猴外的灵长类和啮齿类组成的组中的哺乳动物的细胞。

15.根据权利要求12所述的方法，其中，所述哺乳类细胞为中国仓鼠的细胞或人的细胞。

16.根据权利要求12所述的方法，其中，所述哺乳类细胞为CHO或HEK。

17.根据权利要求12所述的方法，其中，所述哺乳类细胞为CHO DG44或HEK293。

18.根据权利要求12～17中任一项所述的方法，其中，所述因子C为下述(A)、(B)、(C)或(D)所示的蛋白质：

(A)包含序列号2所示的氨基酸序列的蛋白质；

(B)包含在序列号2所示的氨基酸序列中含有一个或几个氨基酸的置换、缺失、插入或添加的氨基酸序列、且具有因子C的活性的蛋白质；

(C)包含序列号4所示的氨基酸序列的蛋白质；

(D)包含在序列号4所示的氨基酸序列中含有一个或几个氨基酸的置换、缺失、插入或添加的氨基酸序列、且具有因子C的活性的蛋白质。

19.根据权利要求12～17中任一项所述的方法，其中，所述因子C为下述(A)或(B)所示的蛋白质：

(A)包含序列号2所示的氨基酸序列的蛋白质；

(B)包含在序列号2所示的氨基酸序列中含有一个或几个氨基酸的置换、缺失、插入或添加的氨基酸序列、且具有因子C的活性的蛋白质。

20.一种鲎的因子C，其可以利用权利要求12～19中任一项所述的方法制造。

21.根据权利要求20所述的因子C，其具有因子C的活性。

22.根据权利要求20或21所述的因子C，其具有(α-2,3)键的末端唾液酸。