[发明专利]基因表达的调控

说明书

本发明提供了一种分离的多核苷酸，其包含编码uORF肽的序列、或其变体或片段。本发明也提供了包含所述多核苷酸的构建体和载体。本发明还提供了转化了所述多核苷酸和构建体的细胞、植物细胞和植物。本发明也提供了使用所述多核苷酸控制可操作地连接的多核苷酸的表达的方法。本发明也提供了利用本发明的多核苷酸在植物中操纵GDP‑L‑半乳糖磷酸化酶(GGP)的表达和抗坏血酸产生的方法。

技术领域

本发明涉及GDP-L-半乳糖磷酸化酶(GGP)表达的控制和操纵以及抗坏血酸的制备。本发明也涉及控制所述表达和制备的序列元件，及其使用。

背景技术

抗坏血酸是植物中最丰富的可溶性抗氧化剂，并且对于人和一些其它动物也是必需的营养素。抗坏血酸显著地促进人类膳食中“游离自由基清除剂”或“抗氧化代谢产物”的全面摄入。令人信服的证据现在表明，这种代谢产物单独或者联合地作为抗癌症形成剂和预防冠心病而有利于健康和身体。

人类摄入的几乎全部膳食抗坏血酸都来源于植物产品。然而，植物组织的抗坏血酸含量显著不同。虽然在草本和木本植物中，叶子的抗坏血酸含量通常很高并且相对一致，但是在非绿色的可食用植物组织中，发现抗坏血酸含量有巨大的无法解释的差异。例如，在果实中，其水平在Mirciaria dubia的卡姆果(camu camu)中高达30mg gFW-1 AsA，而在Mespilus germanica的欧楂果(medlar)中低于3μg gFW-1 AsA(Rodriguez等，1992,JChromatogr Sci,30:433-437)。据报道猕猴桃中抗坏血酸值的变化很大(Ferguson,A.R.,Botanical nominclature:Actinidia chinensis,Actinidia deliciosa,and Actinidiasetosa.Kiwifruit:science and management,ed.I.J.Warrington和G.C.Weston.1990,Palmerston North；New Zealand:New Zealand Society for HorticulturalScience.576.Beever,D.J.和G.Hopkirk,Fruit development and fruitphysiology.Kiwifruit:science and management,ed.I.J.Warrington andG.C.Weston.1990,Palmerston North；New Zealand:New Zealand Society forHorticultural Science.576.)。不同的藤本植物水果的抗坏血酸含量，对于美味猕猴桃(A.deliciosa)范围是30-400mg/100g(Ferguson,A.R.,1991 Acta Hort.290:p.603-656,Spano,D.等，1997 Acta Hort.,.444:p.501-506.)，而对于栽培品种“Hayward”报道的范围在80-120mg/100g(Beever,D.J.和G.Hopkirk,Fruit development and fruitphysiology.Kiwifruit:science and management,ed.I.J.Warrington和G.C.Weston.1990,Palmerston North；New Zealand:New Zealand Society forHorticultural Science.576.)。据报道，软枣猕猴桃(A.arguta)、中华猕猴桃(A.chinensis)(Muggleston,S.等，Orchardist,1998.71(8):p.38-40,Chen,Q.和Q.Chen,Crop Genetic Resources,1998(2):p.3,Coggiatti,S.,1971Ital Agr,Oct,.108(10):p.935-941)、金花猕猴桃(A.chrysantha)和葛枣猕猴桃(A.polygama)的果实中含有较高浓度的抗坏血酸，在毛花猕猴桃(A.eriantha)和阔叶猕猴桃(A.latifolia)中水平非常高(>1％鲜重)(Ferguson 1991 Acta Hort.290:p.603-656.和A.kolomikta(Kola,J.andJ.Pavelka,1988 Nahrung,.32(5):p.513-515)。