[发明专利]亲水性重组蛋白的提取方法有效
| 申请号： | 201380068462.0 | 申请日： | 2013-12-18 |
| 公开（公告）号： | CN104884463B | 公开（公告）日： | 2018-09-18 |
| 发明（设计）人： | 大泽利昭;森田启介 | 申请（专利权）人： | 丝芭博株式会社 |
| 主分类号： | C07K1/14 | 分类号： | C07K1/14;C12P21/02;C07K14/435 |
| 代理公司： | 永新专利商标代理有限公司 72002 | 代理人： | 王灵菇;白丽 |
| 地址： | 日本*** | 国省代码： | 日本;JP |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 亲水性 重组 蛋白 提取 方法 | ||
1.一种亲水性重组蛋白的提取方法，其为从表达亲水性重组蛋白的宿主提取亲水性重组蛋白的方法，其特征在于，其包含：
在所述表达亲水性重组蛋白的宿主中添加溶解用溶剂，获得宿主细胞的溶解物的溶解物获取工序，和
在通过所述溶解物获取工序得到的所述宿主细胞的溶解物中添加稀释用溶剂，然后从得到的稀释液将不溶物分离，回收含有所述亲水性重组蛋白的上清液的工序；
其中，所述亲水性重组蛋白的亲水性指数为0以下，所述溶解用溶剂为非质子性极性溶剂，所述稀释用溶剂为水系溶剂。
2.根据权利要求1所述的亲水性重组蛋白的提取方法，其中，所述溶解用溶剂为不具有环状结构的非质子性极性溶剂。
3.根据权利要求1所述的亲水性重组蛋白的提取方法，其中，所述溶解用溶剂的偶极矩为3.0D以上。
4.根据权利要求1～3中任一项所述的亲水性重组蛋白的提取方法，其中，所述溶解用溶剂为选自二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺和N,N-二甲基乙酰胺中的一种以上的非质子性极性溶剂。
5.根据权利要求1～3中任一项所述的亲水性重组蛋白的提取方法，其中，所述溶解用溶剂为在所述非质子性极性溶剂中添加无机盐而成的溶剂。
6.根据权利要求1～3中任一项所述的亲水性重组蛋白的提取方法，其中，所述稀释用溶剂为选自(1)水、(2)水与乙醇的混合液和(3)水溶性缓冲液中的一种水系溶剂。
7.根据权利要求1～3中任一项所述的亲水性重组蛋白的提取方法，其中，所述溶解用溶剂相对于所述宿主的质量以体积/质量比计添加0.5倍以上，其中体积的单位为mL、质量的单位为g。
8.根据权利要求1～3中任一项所述的亲水性重组蛋白的提取方法，其中，所述稀释用溶剂相对于所述宿主细胞的溶解物以体积比计添加0.5倍以上。
9.根据权利要求1～3中任一项所述的亲水性重组蛋白的提取方法，其中，所述亲水性蛋白为选自重组蛛丝蛋白、重组节肢弹性蛋白和重组胶原中的一种蛋白。
10.根据权利要求4所述的亲水性重组蛋白的提取方法，其中，所述溶解用溶剂为在所述非质子性极性溶剂中添加无机盐而成的溶剂。
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