[发明专利]使用细菌治疗癌症的组合物和方法

说明书

本文提供了包含内毒素活性和/或致热原性显著降低的大体上非活性革兰氏阴性细菌生物体的组合物以及使用它们治疗癌症的方法。还提供了治疗本文提供的癌症的方法，所述方法包括以足以抑制所述癌症生长或转移的量向被诊断患有癌症的哺乳动物施用内毒素活性和/或致热原性显著降低的大体上非活性革兰氏阴性细菌。提供了另外的方法，所述方法包括施用活性或非活性革兰氏阴性细菌生物体，其具有导致所述细菌外膜内的脂多糖显著丧失的遗传缺陷。还提供了降低革兰氏阴性细菌的内毒素活性和/或致热原性的方法，所述方法包括用多粘菌素和戊二醛处理。

相关申请的交叉引用

本申请根据美国法典第35编119(e)要求2013年1月2日提交的美国临时申请61/748,369的权益，其通过引用方式并入本文。

技术领域

本公开涉及包含革兰氏阴性细菌的组合物以及通过施用它们治疗癌症的方法。

背景技术

在经历细菌感染的患者中观察到癌症消退的相关性并在至少早在1868年进行了报道。报道活的减毒的沙门氏菌属生物体至具有实体瘤的动物的全身施用产生肿瘤治疗。参见，如，美国专利第6,685,935号以及Pawelek等人(Lancet Oncol.4(9):548-56，2003)。另外，减毒的革兰氏阳性分支杆菌(BCG)的膀胱内(非全身)施用在美国批准用于治疗和预防膀胱的原位癌(CIS)。

针对某些营养缺陷型突变体，也已经报道使用活的革兰氏阴性沙门氏菌的肿瘤治疗的改善。参见如，Hoffman等人，(Amino Acids 37:509-521，2009，美国专利公布20090300779(Zhao等人)以及Zhao等人(Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)102(3):775-760，2005)。

已经制备在msbB基因座具有删除的沙门氏菌属，其在外膜中表达缺乏脂质A的末端豆蔻酰化的LPS。用这些msbB-沙门氏菌属菌株处理的小鼠和猪中的TNFα诱导分别为野生型细菌诱导的量的33％和14％。参见如，Low等人，Nature17:37-41，1999以及美国专利第7,354,592号(Bermudes等人)。已经报道此类活的生物体，包括菌株VNP20009的施用抑制皮下植入的B16F10鼠黑素瘤以及人肿瘤异种移植物Lox、DLD-1、A549、WiDr、HTB177和小鼠中生长的MDA-MB-231的生长(Luo等人，Oncol.Res.12(11-12):501-508，2001)。也已经报道沙门氏菌属菌株VNP20009在最大耐受剂量以及具有低-剂量节拍式方案两者处改善化疗剂环磷酰胺的抗肿瘤效力(Jia等人，Int.J.Cancer 121(3):666-674，2007)。

已经制备不能产生脂质A并且在外膜中缺乏LPS的革兰氏阴性细菌的条件突变体，但也已经报道其对生物体有毒性。例如，3-脱氧-D-甘露-辛酮糖酸(Kdo)的合成的突变抑制或Kdo分子掺入脂质IV_A的突变抑制防止脂质A和LPS合成并将LPS前体定位至革兰氏阴性细菌的外膜。脂质IV_A为缺乏糖基化的LPS前体。这些突变的激活导致细菌活力的丧失(Rick等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA69(12):3756-3760，1972，Belunis等人，J.Biol.Chem.270(46):27646-27652，1995以及Taylor等人，J.Biol.Chem.275(41):32141-32146，2000)。