[发明专利]结合到CD20和CD95的重组双特异性抗体

权利要求书

1.一种双特异性抗体，其由以下各项组成：

a)Fab片段，所述Fab片段包含用于第一抗原的第一结合位点；

b)scFv片段，所述scFv片段包含用于第二抗原的第二结合位点；

c)单体CH2域，其经修饰以替换一个或多个半胱氨酸残基，所述半胱氨酸残基会形成链间二硫键，其中CH2域通过其N末端结合至Fab片段并通过其C末端结合至scFv片段，其中

-所述第一抗原是CD95，所述第二抗原是CD20，或

-所述第一抗原是CD20，所述第二抗原是CD95；

其中，与CD20结合的结合位点包含抗体轻链可变域(VL)和抗体重链可变域(VH)，所述抗体轻链可变域包含三个互补决定区VL-CDR1-3，所述抗体重链可变域包含三个互补决定区VH-CDR1-3，其中：

i)VL-CDR1由氨基酸序列RASSSVSYM(SEQ ID 12)组成；

ii)VL-CDR2由氨基酸序列APSNLAS(SEQ ID 13)组成；

iii)VL-CDR3由氨基酸序列QQWSFNPPT(SEQ ID 14)组成；

iii)VH-CDR1由氨基酸序列SYNMH(SEQ ID 16)组成；

v)VH-CDR2由氨基酸序列AIYPGNGDTSYNQKFKG(SEQ ID 17)组成；以及

vi)VH-CDR3由氨基酸序列VVYYSNSYWYFDV(SEQ ID 18)组成；

以及其中，与CD95结合的结合位点包含抗体轻链可变域(VL)和抗体重链可变域(VH)，所述抗体轻链可变域包含三个互补决定区VL-CDR1-3，所述抗体重链可变域包含三个互补决定区VH-CDR1-3，其中：

i)VL-CDR1由氨基酸序列RASESVEYYGTSLMQ(SEQ ID 2)组成；

ii)VL-CDR2由氨基酸序列VASNVES(SEQ ID 3)组成；

iii)VL-CDR3由氨基酸序列QQSTKVPWT(SEQ ID 4)组成；

iv)VH-CDR1由氨基酸序列TNAMN(SEQ ID 6)组成；

v)VH-CDR2由氨基酸序列RIRSKSNNYATYYAESVKD(SEQ ID 7)组成；以及

vi)VH-CDR3由氨基酸序列DGYY(SEQ ID 8)组成。

2.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其中：

a)与CD95结合的结合位点的VL域由SEQ ID 1的氨基酸序列组成，与CD95结合的结合位点的VH域由SEQ ID 5的氨基酸序列组成；或者

b)与CD95结合的结合位点的VL域由SEQ ID 9的氨基酸序列组成，与CD95结合的结合位点的VH域由SEQ ID 10的氨基酸序列组成。

3.根据权利要求1所述的双特异性抗体，其中：

a)与CD20结合的结合位点的VL域由SEQ ID 11的氨基酸序列组成，与CD20结合的结合位点的VH域由SEQ ID 15的氨基酸序列组成；或者

b)与CD20结合的结合位点的VL域由SEQ ID 19的氨基酸序列组成，与CD20结合的结合位点的VH域由SEQ ID 20的氨基酸序列组成。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的双特异性抗体，所述双特异性抗体由轻链和重链组成，其中：

a)轻链序列由SEQ ID 21组成，以及重链序列由SEQ ID 23组成；或者

b)轻链序列由SEQ ID 26组成，以及重链序列由SEQ ID 28组成。

5.根据权利要求1所述的双特异性抗体，所述双特异性抗体包含鼠科动物的、嵌合体的和/或人源化的序列。

6.根据权利要求1所述的双特异性抗体，所述双特异性抗体以Kd＜10^-8M结合到CD20，和/或以Kd＜10^-8M结合到CD95。

7.根据权利要求1所述的双特异性抗体，所述双特异性抗体用于医疗用途。