[发明专利]马铃薯中的转化酶沉默使由斑马片和糖端所致的损失最小化的用途

权利要求书

1.一种使马铃薯块茎或由所述马铃薯块茎制得的产品中的糖端频率最小化的方法，其包含破坏所述马铃薯块茎中的液泡转化酶活性，其中所述马铃薯块茎中的所述糖端频率相比于对照马铃薯块茎减少。

2.一种使马铃薯块茎或由所述马铃薯块茎制得的产品中的斑马片症状最小化的方法，其包含破坏所述马铃薯块茎中的液泡转化酶活性，其中所述马铃薯块茎中的斑马片症状相比于对照马铃薯块茎减少。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述液泡转化酶活性通过将编码所述液泡转化酶的液泡转化酶基因的一或多个核苷酸变化引入到所述马铃薯块茎中而破坏。

4.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述液泡转化酶活性通过引入抑制性核苷酸序列而破坏。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述抑制性核苷酸序列选自由反义RNA序列、dsRNAi序列和反向重复序列组成的群组。

6.根据权利要求4所述的方法，其中所述抑制性核苷酸可操作地连接于植物启动子。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述植物启动子选自由组成性启动子、非组成性启动子、诱导型启动子、组织特异性启动子和细胞型特异性启动子组成的群组。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述组织特异性启动子为块茎特异性启动子。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述块茎特异性启动子为与ADP葡萄糖焦磷酸酶基因相关的启动子。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述块茎特异性启动子包含核酸序列SEQ ID NO:6，或因此的任何功能变异体或其功能片段。

11.根据权利要求5所述的方法，其中所述抑制性核苷酸序列为反向重复序列。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述反向重复序列来源于SEQ ID NO:5。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述反向重复序列包含对应于SEQ ID NO:5的+53到+733的有义序列。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述反向重复序列包含对应于SEQ ID NO:5的+552到+49的反义序列。

15.根据权利要求12所述的方法，其中所述反向重复序列包含有含选自由SEQ ID NO:3、15、16和18组成的群组的聚核苷酸序列的有义序列。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述反向重复序列包含有含选自由SEQ ID NO:4、13、14、17和21组成的群组的聚核苷酸序列的反义序列。

17.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述方法包含在马铃薯植物中表达基因沉默盒，其中所述盒包含以反向重复序列形式定向的有义序列和反义序列，其中所述有义序列可以与SEQ ID NO:5在严格杂交条件下杂交，并且所述反义序列为所述有义序列的全长或部分逆向和互补序列。

18.根据权利要求17所述的方法，其中所述有义序列和所述反义序列由间隔子分隔。

19.根据权利要求17所述的方法，其中所述表达盒包含块茎特异性启动子。

20.根据权利要求19所述的方法，其中所述块茎特异性启动子可操作地连接于所述有义序列和所述反义序列。

21.根据权利要求17所述的方法，其中盒的表达下调至少一个内源性转化酶基因的表达从而使马铃薯块茎或由所述马铃薯块茎制得的产品中的糖端频率最小化，和/或使马铃薯块茎或由所述马铃薯块茎制得的产品中的斑马片症状最小化。

22.根据权利要求17所述的方法，其中所述有义序列与所述全长或部分SEQ ID NO:5100％一致。

23.根据权利要求17所述的方法，其中所述反义序列与所述有义序列的所述逆向和互补序列100％一致。

24.根据权利要求17所述的方法，其中所述反义序列并非与所述有义序列的所述逆向和互补序列100％一致，而是与其部分重叠。