[发明专利]用于使用发光检测生物分子的方法和试剂

权利要求书

1.复合物，其包含生物素结合分子和通式(I)的至少两个不同尺寸的金属原子量子簇(AQC)M_n和M’_n’的电荷转移复合物(CTC)：

M_n⁺M’_n′^-(I)，

其中

所述金属AQC的金属M和M’是相同金属或不同金属，

M_n是以其氧化形式M_n⁺存在的较小AQC，

M’_n’是以其还原形式M’_n’^-存在的较大AQC，

M_n⁺和M’_n’^-通过静电相互作用结合，

n和n′分别为M和M’的金属原子数目，并且

n小于n′，

其中所述生物素结合分子与所述电荷转移复合物不共价结合。

2.根据权利要求1所述的复合物，其中所述生物素结合分子是链霉亲和素或其功能等效变体。

3.根据权利要求1或2所述的复合物，其中所述金属M和M’独立地选自过渡金属或其组合。

4.根据权利要求3所述的复合物，其中所述金属M和M’独立地选自过渡金属Au、Ag、Cu及其组合，更优选Au、Ag及其组合。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的复合物，其中n和n′为2至309、2至102、2至55或2至25个金属原子。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的复合物，其中n和n’的差为5至50个原子。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的复合物，其中所述电荷转移复合物还包含与所述原子量子簇M_n和M’_n’连接的ω-羟基酸配体和ω-巯基酸配体。

8.根据权利要求7所述的复合物，其中所述ω-羟基酸具有通式(HO-(CH₂)_m-COOH)，其中m值为2至30，和/或其中所述ω-巯基酸具有通式HS-(CH₂)_p-COOH配体，其中p值为2至30。

9.成套试剂盒，其包含一起的或分开的：

(i)至少两个不同尺寸的金属原子量子簇(AQC)M_n和M’_n’的电荷转移复合物，其中所述电荷转移复合物具有权利要求1中限定的式I，并且其中所述金属AQC的M和M’是相同金属或不同金属，M_n是以其氧化形式M_n⁺存在的较小AQC，M’_n’是以其还原形式M’_n’^-存在的较大AQC，M_n⁺和M’_n’^-通过静电相互作用结合，n和n’分别为金属原子的数目，以及

(ii)生物素结合分子。

10.用于检测样品中的生物素化分子的方法，其包括以下步骤：

(i)使所述样品与根据权利要求1至4中任一项所述的复合物在足以使所述生物素化分子与所述复合物中的生物素结合分子结合的条件下接触，以及

(ii)在步骤(i)的所述接触之后检测在AQC的激发波长下响应于所述样品的激发的所述AQC的荧光发射强度的变化，

其中所述接触步骤之后，所述AQC发射的荧光强度的降低指示所述样品中存在生物素化分子。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述生物素化分子是核酸、多肽或多糖。

12.根据权利要求10或11所述的方法，其中所述生物素结合分子以具有生物素类似物的复合物提供，所述生物素类似物示出的对于生物素结合分子的亲和力低于生物素。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述生物素类似物是4-羟基偶氮苯-2-羧酸(HABA)。