[发明专利]用于检测多个单分子靶分析物的方法和试剂盒

权利要求书

1.用于检测多个单分子靶分析物的方法，包括：

获得多个有序探针试剂组，每个所述有序探针试剂组包含针对N个不同的单分子靶分析物的确定子集的一种或多种探针，其中每个单分子靶分析物是生理样本的一个组分，其中将所述N个不同的单分子靶分析物中的每个不同的单分子靶分析物固定在固体基底上的空间上与N个不同的单分子靶分析物中的任何其它不同的单分子靶分析物分离的位置，且每个所述探针被可检测标记物可检测地标记使得通过单个探针与单个不同的单分子靶分析物的结合产生可检测的信号；

进行至少M个探针结合和信号检测的周期，每个周期包含一个或多个通过，其中每个通过包括使用至少一个所述有序探针试剂组；

从所述至少M个周期检测是否存在来自所述基底的空间上分离的位置的多个信号；和

对于所述N个不同的单分子靶分析物中的一个或多个，从所述多个信号确定每周期至少K比特的信息，其中使用所述至少K比特的信息来确定L总比特的信息，其中KxM＝L比特的信息且L>log₂(N)，并且其中使用所述L比特的信息来确定是否存在所述N个不同的单分子靶分析物中的一个或多个。

2.根据权利要求1所述的方法，其中L>log₂(N)，且其中L包含用于靶识别的比特信息。

3.根据权利要求1所述的方法，其中L>log₂(N)，且其中L包含包括用于解码所述多个有序探针试剂组的顺序的密匙的比特信息。

4.根据权利要求1所述的方法，进一步包括数字化所述多个信号以扩展所述多个信号的检测的动态范围。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述至少K比特的信息包含关于周期中的通过数量的信息。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述至少K比特的信息包含关于所述N个不同的单分子靶分析物中的一个的信号不存在的信息。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述可检测标记物是荧光标记物。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述探针包含抗体。

9.根据权利要求1所述的方法，其中所述探针包含适体。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述适体包含同聚碱基区。

11.根据权利要求1所述的方法，其中所述多个单分子靶分析物包含蛋白质、肽适体或核酸分子。

12.根据权利要求1所述的方法，其中所述从所述至少M个周期检测是否存在多个信号包括光学检测所述多个信号。

13.根据权利要求1所述的方法，其中所述从所述至少M个周期检测是否存在多个信号包括电学检测所述多个信号。

14.根据权利要求1所述的方法，进一步包括从所述L比特的信息确定用于多个输出信号的误差校正。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述误差校正包括使用里德-所罗门编码。

16.根据权利要求1所述的方法，其中所述N个不同的单分子靶分析物存在于样品中，且其中所述样品被分为多个等分部分，所述多个等分部分被稀释为多个不同的最终稀释物，将所述多个等分部分的每一个固定在所述基底的不同的部分。

17.根据权利要求16所述的方法，其中通过计数所述单分子靶分析物在所述不同部分中的一个内的出现次数来确定所述N个不同的单分子靶分析物中的一个的浓度，并根据各个等分部分的稀释来校准计数。