[发明专利]用于检测抗生物制品治疗的中和性自身抗体的测定

权利要求书

1.用于测量样品中抗抗TNFα药物的中和性形式自身抗体的百分比或水平的方法，所述方法包括：

(a)使所述样品与标记抗TNFα药物和标记TNFα接触，以形成：

(i)所述标记抗TNFα药物和所述自身抗体的第一标记复合物；和/或

(ii)所述标记抗TNFα药物、所述标记TNFα和所述自生抗体的第二标记复合物；

(b)对所述第一标记复合物和/或所述第二标记复合物进行大小排阻层析，以将它们从游离的标记TNFα、游离的标记抗TNFα药物和/或标记抗TNFα药物和标记TNFα的复合物分开；

(c)测量大小排阻层析后游离的标记TNFα的水平；和

(d)将步骤(c)中测量的游离的标记TNFα的水平与对照样品中游离的标记TNFα的水平相比较，从而测量中和性形式自身抗体的百分比或水平。

2.权利要求1的方法，其中抗TNFα药物选自REMICADE^TM(英夫利昔单抗)、ENBREL^TM(依那西普)、HUMIRA^TM(阿达木单抗)、(赛妥珠单抗)、(戈利木单抗；CNTO148)，及其组合。

3.权利要求1或2的方法，其中抗所述抗TNFα药物的自身抗体选自人抗嵌合抗体(HACA)、人抗人源化抗体(HAHA)、人抗小鼠抗体(HAMA)，及其组合。

4.权利要求1至3中任一项的方法，其中步骤(c)包括测量大小排阻层析后游离的标记TNFα峰的曲线下面积(AUC)。

5.权利要求4的方法，其中通过测量大小排阻层析后对照样品中游离的标记TNFα峰的AUC来计算对照样品中游离的标记TNFα的水平。

6.权利要求5的方法，其中步骤(d)包括计算样品的游离的标记TNFα峰的AUC与对照样品的游离的标记TNFα峰的AUC的比值。

7.权利要求1至6中任一项的方法，其中在所述样品具有大于所建立的中和性形式自身抗体的阈值时，所述样品是中和性形式自身抗体阳性。

8.权利要求7的方法，其中阈值在约1.25％至约1.30％中和性形式自身抗体之间。

9.权利要求1至8中任一项的方法，其中对照样品是仅含有游离的标记TNFα的参考样品。

10.权利要求1至9中任一项的方法，其中样品是血清。

11.权利要求1至10中任一项的方法，其中样品获自接受抗TNFα药物治疗的个体。

12.权利要求1至11中任一项的方法，其中标记抗TNFα药物和标记TNFα包含不同的荧光团或荧光染料。

13.权利要求1至12中任一项的方法，其中中和性形式自身抗体存在于包含中和性自身抗体和非中和性自身抗体的自身抗体群体中。

14.用于确定抗第一抗TNFα药物的中和性形式自身抗体是否与第二抗TNFα药物交叉反应的方法，所述方法包括：

(a)按照权利要求1至13中任一项的方法测量样品中中和性形式自身抗体的百分比或水平，以确定所述样品是中和性形式自身抗体阳性还是阴性；

如果所述样品是中和性形式自身抗体阳性，则：

(b)使所述样品与标记第二抗TNFα药物接触，以形成所述标记第二抗TNFα药物和所述中和性形式自身抗体的标记复合物；

(c)对所述标记复合物进行大小排阻层析，以分开所述标记复合物；和

(d)检测所述标记复合物，从而确定抗第一抗TNFα药物的中和性形式自身抗体是否与第二抗TNFα药物交叉反应。

15.权利要求14的方法，其中第一和第二抗TNFα药物独立地选自REMICADE^TM(英夫利昔单抗)、ENBREL^TM(依那西普)、HUMIRA^TM(阿达木单抗)、(赛妥珠单抗)、(戈利木单抗；CNTO148)，及其组合。

16.权利要求14或15的方法，其中抗所述第一抗TNFα药物的自身抗体选自人抗嵌合抗体(HACA)、人抗人源化抗体(HAHA)、人抗小鼠抗体(HAMA)，及其组合。