[发明专利]在固相设备上分离和分析核酸分子的非标记方法有效

专利信息
申请号: 201380072172.3 申请日: 2013-12-13
公开(公告)号: CN104968803B 公开(公告)日: 2019-07-26
发明(设计)人: 愼鏞;朴美敬 申请(专利权)人: 第一生物医学私人有限公司
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10
代理公司: 北京三高永信知识产权代理有限责任公司 11138 代理人: 唐述灿
地址: 新加坡新加*** 国省代码: 新加坡;SG
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摘要:
搜索关键词: 设备 分离 分析 核酸 分子 标记 方法
【权利要求书】:

1.一种在固相设备上分离和/或分析核酸分子的方法,包括:

(i)将核酸样品与已二亚胺二甲酯(DMA)在能形成该核酸与该DMA的复合体的条件下进行温育;

(ii)使(i)的该复合体与该固相设备的胺化的表面接触;以及

(iii)通过使用pH>10的洗脱液来将该核酸与该DMA的复合体与所述表面分离,和/或分析该复合体中的该核酸。

2.根据权利要求1所述的方法,其中,用蛋白酶提取该核酸样品。

3.根据权利要求2所述的方法,其中,该蛋白酶为蛋白酶K。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法,其中,该核酸包括甲基化的DNA。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法,其中,该固相设备为微流体设备。

6.根据权利要求1-4中任一项所述的方法,其中,该固相设备为环形谐振器。

7.根据权利要求6所述的方法,还包括:

(i)确定输出光强度,该输出光强度由光学传感系统的检测器测定;

(ii)在温育过程中,确定光学传感系统的谐振器的有效折射率的变化。

8.根据权利要求6所述的方法,其中,所述环形谐振器包括波导结构。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法,其中,该复合体在非甲基化胞嘧啶残基处被修饰。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法,其中,该复合体或该被修饰的复合体被扩增。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的方法,其中,该复合体或该被修饰的复合体被检测。

12.一种用于分离核酸样品中的目标核酸分子的系统,包括:

(i)用于与该核酸分子直接结合以在该核酸分子与DMA化合物之间形成复合体的已二亚胺二甲酯(DMA)化合物;

(ii)用于该核酸分子和该DMA化合物的相互作用以在其上形成复合体的胺化的固体表面;以及

(iii)pH>10的洗脱液,其中,

(A)该固体表面在环形谐振器上,该环形谐振器为光学检测传感器,其中当所述核酸分子与所述DMA结合时,所述检测传感器的读数发生变化,从而使得所述传感器被配置为感测在该核酸分子与该DMA之间形成的复合体;和/或

(B)该系统不包括用于结合该核酸分子的DMA交联蛋白媒介物。

13.根据权利要求12所述的系统,其中,该系统还包括蛋白酶。

14.根据权利要求13所述的系统,其中,该蛋白酶为蛋白酶K。

15.根据权利要求12所述的系统,其中,该固体表面在微流体设备上。

16.根据权利要求12所述的系统,其中,光学检测传感器被配置为在谐振波长处谐振。

17.根据权利要求16所述的系统,还包括可调谐激光器,该可调谐激光器可为该光学传感器提供处于所述谐振波长的光。

18.根据权利要求12-17中任一项所述的系统,其中,该光学传感器或环形谐振器包括波导结构。

19.根据权利要求12-17中任一项所述的系统,其中,当所述核酸分子与所述DMA结合形成所述复合体时,所述谐振器具有偏移的谐振波长。

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