[发明专利]用于分析白细胞的试剂、体系及方法

说明书

本发明的各方面包括可以用于分析全血样品以鉴定、分类和/或定量样品中的白血球(WBC)和WBC亚群的WBC分析试剂、体系和方法。本发明的WBC分析试剂通常包括至少一种膜可渗透的荧光染料、WBC保护剂和表面活性剂。在一些实施方案中，所述WBC试剂包括适量的渗透压调节组分来调节所述WBC试剂的渗透压至所需的范围之内。

交叉引用

本申请要求2013年3月12日提交的美国临时专利申请第61/777,966号的权益，该申请通过引用整体并入本文。

背景

使用自动血液分析仪精确计数并分类全血样品中的白细胞(WBC)是一个重要的诊断过程。通常，通过同时裂解全血样品中的红细胞(RBC，红血球(erythrocyte))并保存全血样品中的WBC来实现WBC分析。现代血液分析仪中通常需要一种或多种WBC试剂来进行这些功能并有助于WBC的分析。

WBC计数和差异化的质量高度依赖于用来进行该分析的方法和相关试剂。配制稳健的WBC分析试剂仍是血液学行业的最大挑战之一。原则上，稳健的WBC试剂导致准确的WBC分析。理想地，精心配制的WBC试剂应有助于(1)在标准条件下彻底裂解红细胞(RBC)，通常在约30秒或更少的时间框架中；(2)将大的红细胞片段破坏或溶解成较小的块；和(3)保护来自RBC裂解工艺的WBC，使得WBC能够被精确地计数并适当地分类。

如果血样不能充分裂解，那么未裂解的RBC(即使是非常小的百分比或浓度)或较大的RBC片段能够干扰WBC分析，因为使用传统的WBC分析技术难以从淋巴细胞(最小的WBC)中分离或区分RBC或较大的RBC。如果血液样本被过裂解，那么通过过度损坏WBC的细胞膜会大大影响WBC的分类。因此，需要能够实现这些目标的改善的WBC的分析试剂、体系和方法。

发明概述

本公开的各方面包括可以用于分析全血样品以鉴定、分类和/或定量样品中的白血球(WBC)和WBC亚群的WBC分析试剂、体系和方法。本发明的WBC分析试剂通常包括至少一种膜可渗透的荧光染料、WBC保护剂和表面活性剂。在一些实施方案中，所述WBC试剂包括适量的渗透压调节组分来调节所述WBC试剂的渗透压至所需的范围之内。

在一些实施方案中，本公开提供了使用自动血液分析仪进行白血细胞(WBC)分析的方法，所述方法包括：(a)用WBC分析试剂稀释全血样品，其中所述WBC分析试剂包含：标记样品中的多个含核细胞的膜可渗透的荧光染料；和当使用血液分析仪分析时将多个WBC亚群彼此分离的渗透压调节组分；(b)在范围为约30℃至约50℃的温度下孵育步骤(a)的稀释血样小于约25秒的孵育时间；(c)将来自步骤(b)的经孵育的样品递送至血液分析仪的流动池；(d)当来自步骤(c)的经孵育的样品穿过流动池时，使用激发源将所述样品激发；(e)收集来自被激发的样品的多个光散射信号和至少一个荧光发射信号；和(f)进行基于在步骤(e)中收集的所有信号的WBC差异分析，同时基于所述至少一个荧光发射信号排除对所述稀释血样内的不满足荧光阈值的任何颗粒的考虑。