[发明专利]脓毒症的即时测定装置和方法

说明书

技术领域

本发明总体上涉及一次性测定测试装置的领域，具体而言用于供即时测定(point-of-care assay)使用。本发明还涉及使用此类装置(包括含有此类装置的套件)，以辅助血液中脓毒症(sepsis)水平的精确测量。

背景技术

脓毒症，或血中毒，是潜在致命的医学病症，其表征为由感染触发的全身性炎症状态。脓毒症是具有许多形式的一大临床实体。宿主对感染的病理生理学反应是复杂的并且全身性炎症的体征和症状可具有感染性或非感染性致病源而且不是特定的。响应于血液、尿液、肺、皮肤、或其他组织中的微生物或病毒，身体可发展全身性炎症反应，最终导致器官功能障碍和死亡。具有全身性感染的患者经常难以与无感染情况下具有相似临床体征和实验室检查结果的患者相区分。感染具有多重原因，包括由细菌、真菌、寄生虫和病毒引起的那些原因。

可通过血流中存在的致病生物来鉴别脓毒症。通常用静脉注射液和抗生素来治疗脓毒症。脓毒症可以是存在多于一个类型的生物的结果，并且在出现严重症状之前尽可能早地鉴别感染的存在以及在治疗期间定期地监测来自患者的血液样品以确保抗生素是有效的并且患者没有遭受进一步的感染这两者都是重要的。

在不幸的临床体征的同时，感染的细菌学证据可能还没有发展。另外，需要时间来使来自血液样品的生物的培养物生长以确认感染性细菌的存在，并且由于污染等原因结果可能是不正确的。如在此使用的，严重的感染可包括诊断为脓毒症、重症脓毒症、败血症、和脓毒性休克、以及弥散性血管内凝血(“DIC”)。感染的定义中还包括全身炎症反应综合征“SIRS”，尽管它可具有感染性以及非感染性的起源(两者都包含在此)。SIRS可展示或发展成为全身性炎症，最后导致多器官功能障碍综合征。患有SIRS的患者可从感染、外伤、烧伤、胰腺炎等发展该综合征。

如在此使用的，可将止血功能障碍可定义为凝固错误。对DIC和脓毒症两者而言，存在对与炎症和凝固相关的共同和重叠的病理生理学途径的日益增加的鉴别。最近的在严重脓毒症中重组人类活性蛋白C(APC)的成功治疗，尤其是在无数不成功的对策之后，将进一步支持这一点。通过凝固辅助因子即Va和VIIIa的失活，APC抑制凝血酶的产生并且还被认为具有抗炎特性。

由于现行诊断方法缺少特异性，存在对发现感染、SIRS以及止血功能障碍的早期指示物或标志物的持续需要。早期诊断可大大地增加患者恢复率并且降低与这类人群相关联的发病率和死亡率。另外，用以监测宿主响应于感染、SIRS和止血功能障碍的治疗功效的诊断标志物或测试也是需要的。

凝固筛查测定的时间依赖性测量分布图已与预测先天性、后天性失衡以及止血功能障碍相关联，如吉文斯(Givens)等人在WO 96/41291和都(Toh)等人在WO 00/46603中所述。曾经这种分布图是关于活化的部分凝血激酶时间(“APTT”)测定的分布图，该测定在凝块形成前具有降低的血浆透光率，现在这种分布图通常称为双相波(在此也称为BPW)。该BPW已与患有DIC的危重患者相关联，该DIC在许多原发性疾病(包括脓毒症)中为常见的。凝固仪器上的双相波提供了简单且快速的测试以用于止血功能障碍(包括DIC)的早期诊断。

如WO 01/96864(2001年12月20日)中所述，在C反应蛋白(CRP)与脂蛋白(特别是极低密度脂蛋白(VLDL))之间的钙离子依赖性复合体已被鉴别为双相波下潜藏的分子机制。该复合体除了可用于鉴别患有可导致出血或血栓形成(包括DIC)的其他止血功能障碍的患者之外还可用于鉴别患有脓毒症、SIRS和败血症的患者。另外，WO 01/96864描述了通过以下方式来检测复合体：凝血测定、乳胶凝聚测定或金溶胶测定、以及免疫测定法，由此取决于所使用的试剂在凝块形成之前或不存在凝块形成的情况下形成沉淀物。

虽然双相波和CRP-脂蛋白复合体提供了在不同种类的严重感染和止血功能障碍(包括DIC和脓毒症)在早期诊断中的进展,但存在对进一步简化测定的持续需要,并且因此可使用少量血液进行并立即给出结果的一种简单的即时测定形式是高度期望的。

发明内容