[发明专利]用于保护免于白喉和/或破伤风的缀合物

说明书

本申请要求美国临时申请61/738,958(2012年12月18日提交)的权益，其完整内容出于所有目的由此通过引用并入本文。

技术领域

本发明是在免疫领域中，特别是使用缀合物疫苗。

背景技术

在单一剂量中含有来自多于一种病原生物体的抗原的疫苗被称为“组合”疫苗。已经证明各种组合疫苗（包括用于保护免于白喉、破伤风和百日咳的早期三价疫苗(“DTP”疫苗)）。当前可用的最复杂的多病原体疫苗是6价的，并且包括白喉、破伤风、百日咳、脊髓灰质炎、乙型肝炎和Hib的抗原(D-T-aP-IPV-HBV-Hib)。这些疫苗已经是非常复杂的，并且获得具有进一步抗原的疫苗的批准不是简单的。

6价疫苗包括缀合至破伤风类毒素载体蛋白的Hib糖。针对其他病原体的已知缀合物疫苗包括分别针对脑膜炎球菌和肺炎球菌的MENVEO?和PREVNAR?产品。接受缀合物疫苗后，已知不仅针对糖、而且针对载体蛋白产生抗体。典型的载体蛋白包括白喉和破伤风类毒素。这些本身是保护性抗原，但参考文献1报道，这些类毒素的缀合物“不足以诱导关于载体的完全免疫”。为什么缀合去除类毒素的保护效力的可能解释可以是糖的共价偶联破坏或掩盖保护性表位(线性或构象的)，或者缀合降低载体蛋白的柔性。

尽管缀合引起保护效力的这种总体损失，但参考文献1报道，破伤风或白喉类毒素甚至在肺炎链球菌糖的缀合之后可以保留其保护作用。作者没有将该发现外推至任何其他糖类，但的确预期，可以用CRM197看到相同结果(参见参考文献1中的[0041])，所述CRM197是白喉毒素的无毒突变体。CRM197是疫苗糖缀合物中的另一种众所周知的载体蛋白，并且它与白喉毒素的不同在于单个氨基酸突变。

参考文献2报道了使用破伤风类毒素的4价脑膜炎球菌缀合物疫苗(现批准为NIMENRIX?产品)的研究。作者报道，100％的疫苗受体产生抗破伤风抗体，但这些患者已经接受包括破伤风类毒素的常规儿科疫苗，并且在接受4价脑膜炎球菌疫苗之前具有抗破伤风抗体的患者的比率已经大于90％。因此，参考文献2没有给出任何关于缀合物疫苗是否可以在未引发的幼稚的婴儿(un-primed na?ve infants)中诱导显著的抗破伤风免疫应答的信息。此外，参考文献2使用无法揭示那些抗体是否具有保护作用的ELISA测试检测抗破伤风抗体。用于测量此类抗体的其他测试(例如，用于测定MENACTRA?产品引发的抗白喉抗体的中和作用的CHO中和测定)也没有揭示抗体是否在体内具有保护作用。

也已经以这种方式研究CRM197。参考文献3显示CRM197在人中是免疫原性的，但，再次，在先前已经接受白喉类毒素疫苗，而不是在幼稚的(na?ve)患者中，测量到免疫应答，并且所述免疫应答通过体外测定(ELISA)、而不是功能测定测定到。

尽管白喉和破伤风类毒素在缀合至细菌糖类后保留至少一些免疫原性，但因此不清楚它们是否保留它们的保护效力。因此，疫苗诸如NIMENRIX?或MENACTRA?是否可以在免疫幼稚受试者中引发保护性抗破伤风或抗白喉免疫是未知的。类似地，缀合的CRM197，如MENVEO?和PREVNAR?产品中所使用，是否可以在这些受试者中引发保护性抗白喉免疫是不清楚的。

发明概述

本发明人已经显示使用白喉类毒素或破伤风类毒素作为载体蛋白(诸如MENACTRA?和MENITORIX?产品)、但不含有类毒素作为单独抗原的现有糖缀合物疫苗可以赋予针对白喉毒素或破伤风毒素的致死攻击的保护。因此，除了保护免受其糖类已经连接至载体的细菌影响以外，此类缀合物疫苗也可以用于保护免于白喉和破伤风。这意味着，当前复杂组合疫苗的白喉和破伤风类毒素组分可以是多余的。因此，可以降低这些疫苗的抗原复杂性，而不降低其保护宽度。此外，去除这些多余组分在疫苗中产生空间用于添加免疫原用于保护免受进一步病原体的影响。例如，现有的六价疫苗D-T-P-HBV-IPV-Hib可以(a)通过去除未缀合的T组分和依赖于Hib缀合物中的T载体而简化，(b)通过用具有T载体的MenC缀合物替代未缀合的T组分而扩展，而不增加抗原复杂性，和/或(c)通过用MenACWY-D缀合物替代未缀合的D组分和在Hib缀合物中的T载体代替未缀合的T而大大扩展，而不相应增加抗原复杂性。

因此，本发明的第一个方面提供了用于针对多种病原体免疫婴儿的方法，其包括用(a)含有未缀合的白喉类毒素、但不含有未缀合的破伤风类毒素的疫苗；和(b)含有缀合至破伤风类毒素载体的糖的疫苗共同免疫婴儿的步骤。