[发明专利]制备脂肪二羧酸的生物学方法

权利要求书

1.一种遗传修饰的解脂耶氏酵母，其包含(i)活性的、修饰的内源酰基辅酶A氧化酶多肽或活性的、修饰的内源酰基辅酶A脱氢酶多肽；(ii)改变天然烯酰辅酶A异构酶活性的遗传修饰；和(iii)改变天然二烯酰辅酶A还原酶(DCR)活性的遗传修饰，其中所述酵母能够从包含一种或多种来自植物油的组分的原料生产二酸。

2.一种遗传修饰的酵母，其包含活性的、修饰的内源酰基辅酶A氧化酶多肽或活性的、修饰的内源酰基辅酶A脱氢酶多肽，该酵母能够从包含一种或多种来自植物油的组分的原料生产二酸。

3.根据权利要求2所述的遗传修饰的酵母，其中所述酵母是遗传修饰的假丝酵母属酵母。

4.根据权利要求3所述的遗传修饰的酵母，其中所述假丝酵母属酵母选自：热带假丝酵母和维斯假丝酵母。

5.根据权利要求所述的遗传修饰的酵母，其中所述假丝酵母属酵母是遗传修饰的ATCC20336酵母。

6.根据权利要求2-5中任一项所述的遗传修饰的酵母，其中所述内源酰基辅酶A氧化酶多肽是POX4多肽。

7.根据权利要求6所述的遗传修饰的酵母，其中所述POX4多肽包含SEQIDNO:30的修饰的氨基酸序列。

8.根据权利要求6-7中任一项所述的遗传修饰的酵母，其中所述POX4多肽在一个或多个选自下组的氨基酸位置处包含氨基酸修饰：88、90、96、98、99、100、102、103、302、309、310、473、474、475、476、477、478、479、480、481、482、483、484、485、486、487、488、489、490、491、492、493、494、495、496、497、498、499、500、501、502、503、504和505。

9.根据权利要求3-5中任一项所述的遗传修饰的酵母，其中所述内源酰基辅酶A氧化酶多肽是POX5多肽。

10.根据权利要求9所述的遗传修饰的酵母，其中所述POX5多肽包含SEQIDNO:32的修饰的氨基酸序列。

11.根据权利要求9-10中任一项所述的遗传修饰的酵母，其中所述POX5多肽在一个或多个选自下组的氨基酸位置处包含氨基酸修饰：81、82、83、84、85、86、88、93、94、95、96、98、102、284、287、290、291、292、294、295、428、429、436、453、454、455、456、457、458、459、460、461、462和463。

12.根据权利要求3-5中任一项所述的遗传修饰的酵母，其中所述酰基辅酶A脱氢酶多肽选自：ACAD、VLCAD、LCAD、MCAD和SCAD多肽。

13.根据权利要求12所述的遗传修饰的酵母，其中所述酰基辅酶A脱氢酶多肽包含SEQIDNO:3685的修饰的氨基酸序列。

14.根据权利要求12-13中任一项所述的遗传修饰的酵母，其中所述酰基辅酶A脱氢酶多肽在VLCAD位置461处包含氨基酸修饰。

15.根据权利要求8、11和14中任一项所述的遗传修饰的酵母，其中所述氨基酸修饰中的至少一个是氨基酸置换。

16.根据权利要求15所述的遗传修饰的酵母，其中所述一种或多种氨基酸置换中的至少一个是保守的。

17.根据权利要求15所述的遗传修饰的酵母，其中所述一种或多种氨基酸置换中的至少一个不是保守的。

18.根据权利要求2所述的遗传修饰的酵母，其中所述酵母是遗传修饰的耶氏酵母属酵母。

19.根据权利要求18所述的遗传修饰的酵母，其中所述耶氏酵母属酵母是解脂耶氏酵母。

20.根据权利要求18-19中任一项所述的遗传修饰的酵母，其中所述内源酰基辅酶A氧化酶多肽选自：POX1多肽、POX2多肽、POX3多肽、POX4多肽、POX5多肽或POX6多肽。

21.根据权利要求20所述的遗传修饰的酵母，其中所述内源酰基辅酶A氧化酶多肽选自：SEQIDNO:3778至3783。