[发明专利]突变型痘苗病毒株、其用途及其制造方法

说明书

本公开提供了能够在肿瘤细胞中选择性地进行复制的突变型痘苗病毒株。本公开还提供了该突变型痘苗病毒株预防和治疗肿瘤的用途。

技术领域

本公开涉及新的突变型痘苗病毒株、其用途及其制造方法。

背景技术

基因治疗在肿瘤治疗研究中已经受到了大量的关注。肿瘤细胞中的治疗基因的转导和表达的效率对于基因治疗方法是至关重要的。已经开发出用于改进肿瘤细胞中的基因转导和表达的效率的各种方法。已经针对用作将关注基因携带到肿瘤细胞的载体的各种病毒的潜力，对其进行了研究和测试。然而，当选择病毒载体作为基因治疗的候选时，肿瘤细胞的病毒载体的安全性和选择性是主要关注的问题。

痘苗病毒与导致天花的病毒密切相关并且已经被用作天花根除项目中的活疫苗。它最近已成为研究课题，其作为用于将关注基因携带并传递到在基因治疗中进行治疗的对象的载体。

痘苗病毒包含两套复制的痘苗病毒生长因子(VGF:vaccinia growth factor)，该痘苗病毒生长因子分别位于痘苗病毒基因组的反向末端重复(ITR:inverted terminalrepetition)。VGF蛋白质是高度糖基化的77残留表皮生长因子(EGF:epidermal growthfactor)样多肽。在病毒感染早期，VGF蛋白质被表达和分泌并用作促细胞分裂剂，以引发用于痘苗感染的周围细胞并且已显示了在痘苗病毒感染中起着至关重要的作用(Buller等J.Virol.62(1988):866-74)。

痘苗病毒还包含丝氨酸蛋白酶抑制剂基因和锚蛋白基因。丝氨酸蛋白酶抑制剂基因是对丝氨酸蛋白酶抑制剂进行编码的基因家族。丝氨酸蛋白酶抑制剂可能涉及多种生物学功能，比如凝固、纤溶、免疫反应、炎症、肿瘤侵袭以及细胞凋亡的调节(参见Kummer等。方法32(2004):141-9)。锚蛋白基因对处理不同的完整膜蛋白质的结合位点的蛋白家族进行编码并且对涉及蛋白质-蛋白质相互作用的生物过程起着至关重要的作用(参见Li等.Biochemistry 45(2006):15168-78)。

发明内容

一方面，本公开涉及一种突变型痘苗病毒株，其能够在肿瘤细胞中选择性地进行复制。在某些实施方式中，该突变型病毒株具有降低的毒力。

另一方面，本公开提供了一种突变型痘苗病毒株，其中，病毒的基因组中的VGF基因的编码序列被全部或部分地截短。

另一方面，本公开提供了一种突变型痘苗病毒株，其中，病毒的基因组中的丝氨酸蛋白酶抑制剂基因的编码序列被全部或部分地截短。

另一方面，本公开提供了一种突变型痘苗病毒株，其中，病毒的基因组中的锚蛋白基因的编码序列被全部或部分被截短。

另一方面，本公开提供了一种产生突变型痘苗病毒株的方法，该方法包括：从病毒基因组中全部或部分地截短VGF基因的编码序列，使得病毒不能表达功能性活性的VGF蛋白质。在某些实施方式中，该方法包括：从病毒基因组中全部或部分地截短VGF基因、丝氨酸蛋白酶抑制剂基因和锚蛋白基因的编码序列，使得病毒不能表达功能性活性的VGF蛋白质、丝氨酸蛋白酶抑制剂蛋白质和锚蛋白蛋白质。

另一方面，本公开提供了突变型痘苗病毒的用途，该突变型痘苗病毒用作用于选择性地将靶基因传递到肿瘤细胞并在肿瘤细胞中表达靶基因的载体。

另一方面，本公开提供了一种用于制造重组基因产物的方法，该方法包括将靶基因插入到本公开的突变型痘苗病毒的基因组。另一方面，本公开提供了一种重组基因产物，该重组基因产物包括本文所描述的突变型痘苗病毒的核酸序列和靶基因的核酸序列。

附图说明