[发明专利]从外周血中产生肿瘤反应性T细胞富集群的方法

说明书

本申请公开了获得富集肿瘤反应性T细胞的细胞群的方法，所述方法包括：(a)从外周血样本中获得外周血单个核细胞(PBMCs)的混合群；(b)从混合群中特异地选择还表达PD‑1和/或TIM‑3的CD8⁺T细胞；和(c)将(b)中选择的细胞与未被选择的细胞分离，以获得富集肿瘤反应性T细胞的细胞群。还公开了向哺乳动物施用富集肿瘤反应性T细胞的细胞群的相关方法、获得包含富集肿瘤反应性T细胞的细胞群的药物组合物的方法、以及分离或纯化的细胞群。

相关申请的交叉引用

本专利申请要求2013年3月1日提交的美国临时专利申请第61/771,251号的权益，将其通过引用的方式整体并入本文。

关于联邦政府资助研究与开发的声明

本发明是由美国国立卫生研究院国家癌症研究所在政府支持下完成的，项目编号为ZIABC010984。政府拥有本发明的某些权利。

发明背景

使用肿瘤反应性T细胞的过继性细胞疗法(ACT)在一些癌症患者中产生了积极的临床反应。然而，在将ACT成功地用于癌症或其它疾病的治疗中仍然存在一些障碍。例如，从外周血中分离到的T细胞可能表现不出足够的肿瘤特异的反应性。因此，需要从外周血中获得肿瘤反应性T细胞群的改进方法。

发明概述

本发明的实施方案提供了获得富集肿瘤反应性T细胞的细胞群的方法，所述方法包括：(a)从外周血样本中获得外周血单个核细胞(PBMCs)的混合群；(b)从混合群中特异地选择还表达PD-1和/或TIM-3的CD8⁺T细胞；和(c)将(b)中选择的细胞与未被选择的细胞分离，以获得富集肿瘤反应性T细胞的细胞群。

本发明另一实施方案提供了向哺乳动物施用富集肿瘤反应性T细胞的细胞群的方法，所述方法包括：(a)从外周血样本中获得PBMCs的混合群；(b)从混合群中特异地选择还表达PD-1和/或TIM-3的CD8⁺T细胞；(c)将(b)中选择的细胞与未被选择的细胞分离，以获得富集肿瘤反应性T细胞的细胞群；和(d)向哺乳动物施用所述富集肿瘤反应性T细胞的细胞群。

本发明另一实施方案提供了获得包含富集肿瘤反应性T细胞的细胞群的药物组合物的方法，所述方法包括：(a)从外周血样本中获得PBMCs的混合群；(b)从混合群中特异地选择还表达PD-1和/或TIM-3的CD8⁺T细胞；(c)将(b)中选择的细胞与未被选择的细胞分离，以获得富集肿瘤反应性T细胞的细胞群；和(d)将所述富集肿瘤反应性T细胞的细胞群与药学上可接受的载体组合，以获得包含富集肿瘤反应性T细胞的细胞群的药物组合物。

本发明另外的实施方案提供了相关的细胞群以及治疗或预防癌症的方法。

附图中几个视图的简要描述

图1A-1B是显示与自体肿瘤细胞系共培养的细胞的干扰素(IFN)-γ的分泌(pg/ml)(黑色柱)以及表达4-1BB的CD8⁺细胞的百分比(灰色柱)的图，所述细胞从黑素瘤患者1913(A)或黑素瘤患者3713(B)的外周血中分离，并通过荧光激活细胞分选术(FACS)基于CD8、PD-1或TIM-3的表达或者PD-1或TIM-3的不表达进行分选，且在体外进行了扩增。

图1C是显示与自体肿瘤共培养的细胞的IFN-γ的分泌(pg/ml)(黑色柱)以及表达4-1BB的CD8⁺细胞(的百分比(灰色柱)的图，所述细胞从黑素瘤患者3289的外周血中分离，并通过FACS基于CD8、PD-1、LAG-3或TIM-3的表达或者PD-1或TIM-3的不表达进行了分选。