[发明专利]将从间充质干细胞诱导的多能干细胞分化为肝细胞的方法

说明书

本发明涉及包含腔昆布提取物(Ecklonia cava)的诱导性多能干细胞脱分化用培养基组合物。并且，本发明涉及将利用上述培养基组合物制备的诱导性多能干细胞分化为肝细胞的方法。若利用本发明的培养基组合物，则可有效地将间充质干细胞制备成诱导性多能干细胞，并且由于所制备的多能干细胞可转化为肝细胞，因而可有效地用作细胞治疗剂。

技术领域

本发明涉及利用间充质干细胞的多能干细胞诱导培养基组合物，制备诱导性多能干细胞，并将诱导性多能干细胞分化为肝细胞的方法。

背景技术

干细胞是能够在各组织中获取的分化之前步骤的未分化细胞的统称。干细胞具有在未分化状态下，规定期间内能够持续地制造出与自身相同的细胞的性质，以及在适当的条件下，能够分化为组成生物组织的多种细胞的性质。

根据分化能力和生成时期，干细胞大致可以分为胚胎干细胞(embryonic stemcell)和成体干细胞(adult stem cell)。并且，根据干细胞的分化能力，还可以分为多能性(pluripotency)、多潜能性(multipotency)及单能性(unipotency)干细胞。

成体干细胞可以分为多潜能性或单能性干细胞。作为典型的成体干细胞有间充质干细胞(mesenchymal stem cells；MSCs)和造血干细胞(hematopoietic stem cells；HSCs)。间充质干细胞分化为软骨细胞(chondrocyte)、成骨细胞(osteoblast)、脂肪细胞(adipocyte)、肌细胞(myocyte)、神经细胞(neuron)，造血干细胞主要分化为红细胞、白细胞、血小板等血液中的血球细胞。

相反，由于多能干细胞可以分化为构成生物体的3种全部胚叶(germ layer)，因而指称具有可以分化为人体的全部细胞或脏器组织的多功能性的干细胞，通常，胚胎干细胞属于多功能性干细胞。由于人体胚胎干细胞由可以成长为人类生命体的胚胎形成，因而存在诸多伦理性问题，但相对于成体干细胞，细胞增殖及分化能力优秀。虽然可以在骨髓、血液、大脑、皮肤等中获取成体干细胞而少存在伦理性问题，但相对于胚胎干细胞，具有有限的分化能力。

作为用于克服如上所述的问题的方案，尝试了用于使来源于成体的细胞脱分化，来制备与胚胎干细胞相似的定制型多能干细胞的各种方法。作为典型的方法有细胞融合法(fusion with ES cell)、体细胞核移植法(somatic cell nuclear transfer)、特定因子注入法(reprogramming by gene factor)等。由于诱导的细胞还具有2对基因，因而细胞融合法存在细胞的安全性方面的问题，而体细胞核移植法存在需要大量的卵子且效率非常低的问题。并且，特定因子注入法作为为了插入特异性基因来诱导脱分化而利用包含致癌基因的病毒的方法，由于引发癌症的危险性高、效率低、方法操作方面上的难度，因而在细胞治疗剂的开发可能性方面上存在问题。

为了成功地、大量地获得多能干细胞，在培养分离的脐带来源单核细胞的步骤中的培养组合物极其重要，需要进行通过更多量、高效率的诱导方法制备多能干细胞的研究。

作为如上所述的背景技术所说明的事项仅用于促进对本发明的背景的理解，不可以被认定为属于本领域所属的普通技术人员公知的以往的技术。

发明内容

技术问题

本发明人努力寻找高效率地诱导用于使安全性和生产效率高的细胞治疗剂的开发迈向实用化的多能干细胞的方法。结果，确认了在将作为安全的天然提取物的腔昆布提取物放入细胞培养基时，可以从间充质干细胞制备出诱导性多能干细胞，并能够以既安全又高的效率，使诱导性多能干细胞分化为肝细胞，从而完成了本发明。

因此，本发明的目的在于，提供用于使包含腔昆布提取物的间充质干细胞脱分化为诱导性多能干细胞的培养基组合物。