[发明专利]一种利用石墨烯组装多层生物酶传感器提高检测性能的新方法

权利要求书

1.一种利用石墨烯组装多层生物酶传感器提高检测性能的新方法，其主要特征在于：

（1）用芘丁酸对生物酶进行改造（以葡萄糖氧化酶为例），使其表面带有大π环端基：取葡萄糖氧化酶5mg，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐（EDC）10 mg，N-羟基丁二酰亚胺 （NHS）2 mg溶于9.5 mL pH=7.4的磷酸缓冲溶液中；取2 mg 芘丁酸溶于1 mL N,N-二甲基甲酰胺 (DMF)中；将 0.5 mL芘丁酸溶液缓慢的滴加到上葡萄糖氧化酶溶液中，室温下搅拌10 小时， 反应结束后，在磷酸缓冲溶液中用截留分子量8千的透析袋透析去除未反应的小分子，得到芘丁酸改性的葡萄糖氧化酶；

（2）葡萄糖氧化酶传感器的组装：直接将玻碳电极浸泡到0.1 mg/ mL的常规的石墨烯分散液中，用石墨烯去修饰玻碳电极的表面；然后将石墨烯修饰的玻碳电极浸泡到芘丁酸改性的葡萄糖氧化酶溶液中，通过芘端基与石墨烯之间的π-π叠加作用，将芘丁酸改性的葡萄糖氧化酶固定到石墨烯修饰的电极表面；然后重复上述步骤，经过这种逐步层层组装的方式来获得不同葡萄糖氧化酶和石墨烯层数、灵敏度可控的葡萄糖氧化酶传感器。

2.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（1）中用芘丁酸改性葡萄糖氧化酶使其表面带有大π环端基；然后通过π-π叠加作用将改性酶连接到石墨烯表面，从而解决了葡萄糖氧化酶和石墨烯难以稳定组装的难题。

3.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（2）中经过这种逐步层层组装的方式来获得不同层数、灵敏度可控的葡萄糖氧化酶传感器。

4.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：一般生物酶的表面大都会有数个氨基，通过这些氨基用1所述的方法进行改造，使其表面带有大π环基团，然后用石墨烯组装其它层数和灵敏度可控的生物酶传感器。