[发明专利]一种四氢嘧啶类化合物的制备方法及其应用

说明书

本发明公开了一种四氢嘧啶类化合物的制备方法，所述四氢嘧啶类化合物具有如式（Ⅴ）所示的通式：其中，R1=H，OH；R2=H，烷基，芳香基，杂环基。所述四氢嘧啶类化合物由云南链霉菌大理变种（S.Yunnanensis var daliensis）CGMCC No.5912发酵获得，可应用于植物病毒性病害的防治，在农业上具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明属于生物技术和植物保护领域，具体地说，是关于一种四氢嘧啶类化合物的制备方法及其在植物保护领域中的应用。

背景技术

病毒病是对农作物危害严重并难以防治的顽固性病害，作物一旦感染上病毒病，将会出现花叶、小叶、嫩叶或植株出现条斑、果实畸形甚至全株枯死。病毒病害的传播、浸染和致害过程与细菌性病害和真菌性病害的表现有很大的区别。目前我国田间常见的病毒性病害主要有：水稻条纹叶枯病、水稻黑条矮缩病、烟草花叶病、蔬菜花叶病毒病、马铃薯花叶病毒病、番茄病毒病辣椒病毒病等。2010年，在我国南方多个省份发生了大面积的水稻黑条矮缩病，造成了粮食的严重减产。而目前国内外用于防治植物病毒性病害的药剂主要以无机化合物的铜制剂以及化学合成的核苷类化合物为主，如我国《农药登记公告》中的盐酸吗啉胍·乙酸铜、氯溴异氰尿酸、氨基寡糖素、三氮唑核苷·硫酸铜·硫酸锌、菌毒清、烯腺嘌呤·羟烯腺嘌呤·盐酸吗啉胍·硫酸锌·硫酸铜、混合脂肪酸·硫酸铜、盐酸吗啉胍等。在现有产品中，只有宁南霉素一种为生物农药。随着人们对环保意识的加强和对食品安全的重视，人们对生物农药需求的呼声越来越高。

在生物农药中，微生物源农药是作用明确、环境友好的一类相对安全的农药，由于微生物具有生长周期短，代谢易于调控，可通过发酵实现大规模生产的特点，所以利用微生物发酵技术制备生物活性物质具有良好的工业化生产前景。

发明内容

本申请的发明人通过培养一种云南链霉菌大理变种（S.Yunnanensis vardaliensis）CGMCC No.5912（201210438796.X）后，进一步利用纯化手段，可得到四氢嘧啶类化合物，并首次发现本发明的四氢嘧啶类化合物对于烟草花叶病毒具有较好的抑制作用，可用于植物病毒性病害的防治。

因此，本发明的一个目的在于提供四氢嘧啶类化合物的制备方法。

本发明的另一个目的在于提供所述四氢嘧啶类化合物用于植物病毒性病害的防治的应用。

本发明提供了一种四氢嘧啶类化合物的制备方法，由云南链霉菌大理变种（S.Yunnanensis var daliensis）CGMCC No.5912发酵获得，

其中，所述四氢嘧啶类化合物具有如式（Ⅴ）所示的通式：

其中，R1=H，OH；R2=H，烷基，芳香基，杂环基。

根据本发明的优选实施例，所述发酵的发酵培养条件为：

发酵温度26～30℃，发酵时间4～5天；

发酵培养基：花生饼粉3%，淀粉1%，可溶淀粉1.5%，玉米面1%，葡萄糖0.5%，酵母粉0.1%，食盐0.3%，碳酸钙0.3%，硫酸铵0.25%，磷酸二氢钾0.025%，硫酸镁0.0025%，pH7.0。

根据本发明，所述制备方法还包括将发酵液经阳离子交换树脂、分子筛和高压液相色谱分离精制的步骤。

本发明还提供了所述四氢嘧啶类化合物的应用，用于植物病毒性病害的防治，

其中，所述四氢嘧啶类化合物具有如式（Ⅴ）所示的通式：

其中，R1=H，OH；R2=H，烷基，芳香基，杂环基。

根据本发明，所述植物病毒性病害为烟草花叶病毒。