[发明专利]一种协同抑癌的前列腺癌药物组合物

说明书

技术领域

本发明公开了黄酮(Flavone)与双氢睾酮(DHT)在治疗前列腺癌中的协同作用，即当存在体内正常浓度的双氢睾酮时，黄酮才能正常发挥抑癌作用，抑制前列腺癌增殖，并促进前列腺癌凋亡。本发明涉及生物工程技术领域。

背景技术

前列腺癌是严重威胁全世界男性健康的恶性肿瘤，为老年人疾病，研究表明环境和饮食因素是影响前列腺癌发生发展的重要因素。在亚洲国家，其发病率和死亡率明显低于西方国家。相比西方国家，亚洲饮食中更多黄酮类物质的摄入引起了世界研究者的广泛关注。

黄酮是类黄酮类植物雌激素的一种，关于黄酮对癌症的作用学术界有两种看法：有报道表明黄酮对包括前列腺癌在内的多种肿瘤具有显著的预防作用，但也有报道显示黄酮对包括前列腺癌在内的多种肿瘤细胞增殖呈现促进作用。

值得一提的是，前列腺癌是一种增龄性疾病，发病率随着年龄增长而逐渐升高，而且前列腺癌是一种潜伏癌，80岁以上人群中可达40%，可能是由于年龄增加，体内双氢睾酮水平下降导致，但双氢睾酮与前列腺癌相关性及其分子机制尚不明确。前列腺癌早期治疗采用摘除睾丸并给以雄激素拮抗剂的去势治疗，但是多数术后前列腺癌患者会病情复发，复发的原因和分子机制尚不明确，提示了雄激素可能的抗癌作用。

我们的研究发现黄酮与双氢睾酮在治疗前列腺癌中起协同作用，共同存在时发挥抑制前列腺癌的保护作用；且只有存在正常浓度的双氢睾酮时，黄酮才能正常发挥对前列腺癌的抑癌作用，二者缺一不可。

发明内容

本发明公开了黄酮(Flavone)与双氢睾酮(DHT)在治疗前列腺癌中的协同作用，即当存在体内正常浓度的双氢睾酮时，黄酮才能正常发挥抑癌作用，抑制前列腺癌增殖，并促进前列腺癌凋亡。

首先，以细胞周期重要调控基因p21^WAF1/Cip1启动子的转录活性为检测指标，我们发现黄酮和双氢睾酮具有激活p21^WAF1/Cip1转录的协同作用。进一步，我们发现过表达ERβ放大这种协同效应，而ERα或AR没有明显作用。通过基因ERβ过表达和基因沉默实验，我们证明黄酮和双氢睾酮协同活p21^WAF1/Cip1转录效应是通过ERβ的分子靶点实现的。蛋白质表达检测表明，过表达ERβ显著上调了p21^WAF1/Cip1的表达，而基因敲除ERβ则逆转了这个作用。以上结果证明了黄酮和双氢睾酮激活p21^WAF1/Cip1启动子是通过ERβ实现的。

通过MTT试验，证明黄酮和双氢睾酮协同抑制了前列腺癌DU145细胞的增殖，而且这种抑制作用可以被ERβ过表达所增强，被ERβ-shRNA所逆转。采用碘化丙叮检测细胞周期证明了黄酮和双氢睾酮协同时，细胞出现亚G1期细胞凋亡峰，细胞凋亡可以被ERβ过表达所增强，被ERβ-shRNA所逆转。同时黄酮与双氢睾酮的共刺激抑制了细胞增殖指标BcL2、PCNA的蛋白表达，促进了细胞凋亡指标Caspase3活化型的发生，这种作用可被ERβ-shRNA所逆转。以上结果证明黄酮与双氢睾酮激活ERβ后显著抑制细胞增殖，并促进细胞凋亡。

本发明提供了一种治疗前列腺癌的新型手段和分子机制，即黄酮与双氢睾酮通过协同效应激活ERβ，上调细胞周期调控相关基因p21^WAF1/Cip1，实现前列腺癌中的治疗作用。

具体实施方式：

p21^WAF1/Cip1是一种细胞周期蛋白（CyciinS）依赖激酶（CDKS）的抑制蛋白（CKI），是调控细胞周期的基因。当DNA损伤和细胞衰老时，p53增多并诱导p21^WAF1/Cip1转录，p21^WAF1/Cip1与相应的CDK-Cyclin复合物结合，抑制其蛋白激酶的激活，阻滞细胞周期的运行。目前p21^WAF1/Cip1的激活已经成为抗肿瘤药物发现的重要分子靶点。