[发明专利]载脂蛋白AⅠ抗血清的制备方法

权利要求书

1.一种载脂蛋白AⅠ抗血清的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：

1) 高密度脂蛋白的提取：将用于制备载脂蛋白AⅠ的血清通过浓度为6%-22%的多阴离子化合物和浓度为2-6mol/L的二价金属离子处理后提纯获得高密度脂蛋白；

2) 载脂蛋白AⅠ的提取：将获得的高密度脂蛋白通过浓度为4-10mol/L盐酸胍处理后经过超速离心、梯度层析，获得载脂蛋白AⅠ；

3) 载脂蛋白AⅠ抗血清的制备：将载脂蛋白AⅠ作为抗原，对免疫动物进行免疫反应，制备载脂蛋白AⅠ抗血清。

2.如权利要求1所述的载脂蛋白AⅠ抗血清的制备方法，其特征在于：所述第1)步骤中，所述用于制备载脂蛋白AⅠ的血清通过多阴离子化合物和二价金属离子处理后，需再经过浓度为0.3-1mol/L的草酸钾沉淀除去多阴离子化合物和二价金属离子，获得高密度脂蛋白粗品。

3.如权利要求2所述的载脂蛋白AⅠ抗血清的制备方法，其特征在于：所述获得的高密度脂蛋白粗品,需进一步用超速离心提纯时将密度范围缩小到1.075-1.190 d。

4.如权利要求2所述的载脂蛋白AⅠ抗血清的制备方法，其特征在于：所述获得的高密度脂蛋白粗品需依次经过溴化钾进行密度调节，然后用生理盐水透析后，离心，提纯，获得高密度脂蛋白纯品。

5.如权利要求2所述的载脂蛋白AⅠ抗血清的制备方法，其特征在于：所述血清中多阴离子化合物、二价金属离子和草酸钾残留的浓度依次分别为6%、0.3mol/L和0.03mol/L。

6. 如权利要求1所述的载脂蛋白AⅠ抗血清的制备方法，其特征在于： 所述第2)步骤所述的盐酸胍处理包括将高密度脂蛋白依次通过盐酸胍、溴化钾、生理盐水和浓度为5-11mol/L的尿素进行处理。

7.如权利要求6所述的载脂蛋白AⅠ抗血清的制备方法，其特征在于：所述经过盐酸胍处理的高密度脂蛋白通过凝胶柱层析纯化获取载脂蛋白AⅠ，并将载脂蛋白AⅠ进行冰冻保存。

8.如权利要求7所述的载脂蛋白AⅠ抗血清的制备方法，其特征在于：所述冰冻保存的温度为零下20℃至零下80℃。

9.如权利要求1所述的载脂蛋白AⅠ抗血清的制备方法，其特征在于：所述第3)步骤中，所述作用在免疫动物上的载脂蛋白AⅠ的量为每次8 – 14mg/每只免疫动物。

10.如权利要求1-9任意一项所述的载脂蛋白AⅠ抗血清的制备方法，其特征在于：所述用于制备载脂蛋白AⅠ的血清均通过乙型肝炎病毒表面抗原、丙型肝炎病毒表面抗体以及人类免疫缺陷病毒Ⅰ型和Ⅱ型抗体检测，且检测结果须呈阴性。