[发明专利]中药复方药物组合物的新用途有效
申请号: | 201410004070.4 | 申请日: | 2014-01-03 |
公开(公告)号: | CN104762253B | 公开(公告)日: | 2018-03-06 |
发明(设计)人: | 陆华;邓延莉;万谦 | 申请(专利权)人: | 成都中医药大学 |
主分类号: | C12N5/0735 | 分类号: | C12N5/0735;C12N5/0775 |
代理公司: | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙)51222 | 代理人: | 李高峡,张娟 |
地址: | 611137 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 中药 复方 药物 组合 用途 | ||
1.含有下述重量配比的原料药在制备促使干细胞向生殖细胞分化的诱导液中的用途:熟地18-30份、山茱萸9-12份、山药8-16份、枸杞子9-12份、菟丝子8-16份、鹿角胶8-16份;
所述干细胞为鼠胚胎干细胞;
所述诱导液是上调细胞的Oct-4、Stra8、TP2、Itgβ1、GDF-9、ZP3的表达水平的诱导液;
所述诱导液是以常用细胞培养基为基础培养基,添加含药血清,其终浓度为2~20%(v/v);
所述含药血清按照如下方法制备:
(1)按照前述配比取原料药,制备成为超细粉,以5.0g/kg的剂量施用于鼠,施用方式为口服给药;
(2)给药30min、60min、90min后,眼底静脉丛取血,分别静置、离心得上清液,混匀,过滤除菌,即可;
所述常用细胞培养基为α-MEM培养基、DMEM-高糖培养基、DMEM-低糖培养基、RPMI-1640培养基、DMEM/F12培养基或M-199培养基。
2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于:所述原料药的重量配比如下:熟地24份、山茱萸9-12份、山药12份、枸杞子9-12份、菟丝子12份、鹿角胶12份。
3.根据权利要求2所述的用途,其特征在于:所述原料药的重量配比如下:熟地24份、山茱萸12份、山药12份、枸杞子12份、菟丝子12份、鹿角胶12份。
4.根据权利要求1所述的用途,其特征在于:所述含药血清的终浓度为4.5~5%(v/v)。
5.根据权利要求1所述的用途,其特征在于:所述诱导液中还添加有终浓度为10~20%(v/v)的胎牛血清和/或1%(v/v)青链霉素。
6.一种促使干细胞分化为生殖细胞的方法,其特征在于:步骤如下:取干细胞,置于诱导液中培养至少21天,即可;所述干细胞为鼠胚胎干细胞;
所述诱导液是上调细胞的Oct-4、Stra8、TP2、Itgβ1、GDF-9、ZP3的表达水平的诱导液;
所述诱导液是以常用细胞培养基为基础培养基,添加含药血清,其终浓度为2~20%(v/v);
所述含药血清按照如下方法制备:
(1)按照权利要求1~4任意一项所述配比取原料药,制备成为超细粉,以5.0g/kg的剂量施用于鼠,施用方式为口服给药;
(2)给药30min、60min、90min后,眼底静脉丛取血,分别静置、离心得上清液,混匀,过滤除菌,即可;
所述常用细胞培养基为α-MEM培养基、DMEM-高糖培养基、DMEM-低糖培养基、RPMI-1640培养基、DMEM/F12培养基或M-199培养基。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于:所述含药血清的终浓度为4.5~5%(v/v)。
8.根据权利要求6所述的方法,其特征在于:所述诱导液中还添加有终浓度为10~20%(v/v)的胎牛血清和/或1%(v/v)青链霉素。
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