[发明专利]一种规模化分级制备小球藻活性组分的工艺方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，尤其涉及一种规模化分级制备小球藻活性组分的工艺方法，具体是指，一种利用小球藻为原料并分级制备叶绿素、藻油（脂肪酸甘油酯）、小球藻生长因子、小球藻水解蛋白肽的规模化生产工艺方法。

背景技术

小球藻（Chlorella）是一种单细胞绿藻，常见的养殖种类有蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)、普通小球藻(Chlorella vulgaris)、原始小球藻（Chlorella protothecoides）等。小球藻是一种营养全面、均衡的人类食品，易被人体直接吸收和利用其，蛋白质含量高达50%以上%，氨基酸组成优于常见蛋白类食品；小球藻中叶绿素含量可高达2-4％，是叶绿素含量最高的食物；室外光照培养的小球藻中脂肪酸含量为15%左右，多糖含量为15%左右，核酸（DNA/RNA）含量在4%左右；同时，小球藻还有富含维生素、矿物质等物质，是维持和促进人体健康所不可缺少的营养素。

小球藻中叶绿素含量可高达2-4％，是叶绿素含量最高的生物之一，比螺旋藻高2-3倍，叶绿素易被人体吸收，对机体及细胞有复活作用和促进新陈代谢的功效。在药用方面，有保肝护肝、促进伤口愈合、抑制癌变、降低胆固醇、抗过敏、抑菌除臭的作用，可以治疗肝炎、胃溃疡、十二指肠溃疡、口腔溃疡、急性胰腺炎、慢性肾炎等，并能促进血红蛋白的合成。

小球藻中的脂肪酸因培养方法的不同含量变化较大，室外光合培养的小球藻中含量一般在15～20%左右，其中亚油酸和亚麻酸的含量占总脂肪酸含量的50-60%左右，与大豆油相差无几，尤其是亚麻酸可占到总脂肪酸含量的35%以上，是一种优质的食用油，也可用于炼制生物柴油。

小球藻生长因子（Chlorella Growth Factor，CGF），是从小球藻热水提取物中获得的一类物质，CGF中含有氨基酸、氨基肽、水溶性蛋白、结合蛋白、糖蛋白、维生素、矿物质、类谷胱甘肽物质、RNA/DNA、免疫多糖、植物激素、自然生长因子等多种物质，具有促进细胞生长、增强免疫、清除毒素、抗辐射、创伤修复、抗炎症等多种功效，是小球藻中功效最全、效价最高、经济价值最大的成份组。

小球藻的蛋白/蛋白肽易被人体直接吸收和利用（吸收率高达84％），适合于不同人群使用，给人类提供了一个最丰富均衡的营养源。小球藻作为小球藻蛋白质含量高达50%-70%，是一种极好的蛋白源，必需氨基酸组成优于大豆、肉类、牛奶、鱼、鸡蛋等常见蛋白类食品，更符合人类的营养需求，新近的研究发现，小球藻中某些糖蛋白和多肽组分具有增强免疫、抗氧化、抑制肿瘤等活性。

小球藻多糖含量一般在15%以上，其中胞壁多糖约占干重的7％以上，主要由半乳糖和阿拉伯糖组成，其余为水溶性多糖，。研究已经证明，其在动物体内具有免疫调节（免疫增强和免疫激活）、抗炎症、中枢神经安定等功效，尤其是在免疫方面的功效尤为突出。

现有技术中的小球藻提取工艺方法或者只局限于个别物质提取，容易造成其他大量成分的浪费；或者过程繁琐、能耗物耗大、使用试剂有毒有害、规模化制备难度高。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足而提供一种规模化分级制备小球藻活性组分的工艺方法，该规模化分级制备小球藻活性组分的工艺方法能够分级提取小球藻中的有效成份并使之可用于开发有价产品，以实现小球藻多元化开发利用，大大提高小球藻附加值，进而实现商业利益最大化；另外，该规模化分级制备小球藻活性组分的工艺方法简单、快捷、高效且适于规模化应用的。

为达到上述目的，本发明通过以下技术方案来实现。

一种规模化分级制备小球藻活性组分的工艺方法，包括有以下工艺步骤，具体为：

a、原料预处理：利用鲜活小球藻藻液或者小球藻干粉制备小球藻藻泥，而后将小球藻藻泥进行冰冻处理并制备成藻冰；

b、破壁萃取：将经步骤a所获得的藻冰倒入于萃取容器中，并往萃取容器内加入有机萃取溶剂，经破壁萃取后获得含有叶绿素和藻油的有机相层Ⅰ以及含有小球藻破壁细胞浆的水相层Ⅰ；

c、脂质分溶：往经步骤b所获得的有机相层I中加入作为萃取分溶剂的乙醇和水，经分溶后获得含有藻油的有机相层Ⅱ以及含有叶绿素的水相层II；

d、藻油浓缩：将经步骤c所获得的有机相层Ⅱ进行浓缩处理并脱去其中的乙酸乙酯，即获得粗藻油产物；

e、叶绿素干燥：将经步骤c所获得的水相层II进行干燥处理，即获得小球藻叶绿素粗品；