[发明专利]一种干细胞因子缓释微球及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，特别涉及一种干细胞因子缓释微球及其制备方法。

背景技术

据研究在已婚人群中有将近15%的夫妇存在着不孕不育，而其中近一半是由男性因素引起的。引起男性不育的原因是复杂的，其中无精子症大约占了10%。无精症可分为梗阻性无精症(Obstructive azoospermia,OA)和非梗阻性无精症(Non-obstructive azoospermia，NOA)。NOA患者的睾丸生精功能缺陷,甚至不能产生精子。一部分NOA患者睾丸内仍然可以找到精子，通过单精子胞浆内注射技术（ICSI）获得生育机会；另一部分睾丸内无精子生成的患者就没有生育机会，这部分患者是治疗的难点。研究发现，很多睾丸内没有精子NOA患者睾丸局部都有生精细胞存在，即便是唯支持细胞综合症(sertoli cell only syndrome，SCOS)也可以在其睾丸的局部找到生精细胞；这一研究结果给了我们有益的启示：如果能够有效促进NOA患者睾丸内残存的各级生殖细胞发育成精子，则有望获得作ICSI治疗的精子，解决临床难题。目前想到的解决方法有同种异体生殖细胞移植和生殖细胞的体外培养，但是由于伦理及技术等各种原因而无法推广。

干细胞因子(stem cell factor,SCF)又被称为干细胞生长因子(stem cell growth factor,SCGF)、肥大细胞生长因子(mast cell growth factor,MGF)、steel(SL)factor或c-kit蛋白配体(c-kit ligand,KL)，是1990年发现的一种重要的造血细胞因子。多种资料表明SCF/c-kit系统与男性生精细胞发育增殖具有十分密切的关系，它通过PI3K通路与MEK通路途径调节生精细胞的自我更新和增殖，这两种通路彼此独立，不存在交叉反应。鉴于以上研究结果，我们想到：增加NOA患者睾丸内SCF的浓度，有可能使其残余的生殖细胞发育成精子，使NOA患者获得生育机会。但是SCF属多肽类药物，蛋白质多肽类药物半衰期短需频繁给药来维持有效治疗浓度，导致治疗周期长，注射次数多，患者依从性差，坚持完成疗程者少。

因此，提供一种能够长时间持续发挥作用的干细胞因子缓释微球具有重要的现实意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题为提供一种干细胞因子缓释微球及其制备方法。本发明以乳酸-羟基乙酸共聚物为载体材料，采用复乳-溶剂挥发法制备的干细胞因子缓释微球，体内可以连续释放17天，体内累积释放率达70%。

具体地，本发明提供了一种干细胞因子缓释微球，包含干细胞因子、重均分子量为6,000-25,000的乳酸-羟基乙酸共聚物、助溶剂和稳定剂；所述干细胞因子缓释微球的平均粒径为8.4～9.8μm。

微球缓释给药系统是一种药物载体给药系统，它以生物可降解聚合物为载体材料将药物包封于微球载体中，通过微球内部的孔道以及高分子材料的溶蚀降解来调控药物在体内外的释放，延长药物作用时间，提高药物稳定性，改变药物在体内的分布，使药物浓集于靶区，提高疗效，降低毒副作用。本发明的载体材料为乳酸-羟基乙酸共聚物，由两种单体——乳酸和羟基乙酸随机聚合而成，是一种可降解的功能高分子有机化合物，具有良好的生物相容性、无毒、良好的成囊和成膜的性能。

作为优选，所述乳酸-羟基乙酸共聚物中，乳酸与羟基乙酸的聚合比例（摩尔比）为50:50。

作为优选，所述干细胞因子与乳酸-羟基乙酸共聚物的重量比为1：2×10⁵。

作为优选，所述聚乙烯醇的分子量为31000-50000。

作为优选，所述干细胞因子与聚乙二醇、聚乙烯醇的重量比为0.00001：0.02：1。

作为优选，所述助溶剂为聚乙二醇、乳糖、微晶纤维素或聚乙烯吡咯烷酮中的一种或两者以上的混合物。

作为优选，所述稳定剂为聚乙烯醇。

本发明所述缓释微球形态良好、粒径分布均匀，缓释性能良好，表现在以下两个方面：（1）缓释时间长：体外缓释可达一个月，体内释放可持续17天；（2）累积释放率高：体外累积释放率约为90%，体内累积释放率约为70%；可减少患者的给药频率，提高患者的依从性。另外，本发明干细胞因子缓释微球载药量可达4.6ng/mg。

本发明还提供了一种上述干细胞因子缓释微球的制备方法，该方法包括以下步骤：

（1）将将0.5体积份内水相溶液与8体积份油相溶液混合，并以4000-6000rpm转速搅拌30s形成初乳；