[发明专利]一种重组菌株与制备碱性β-甘露聚糖酶的方法在审

专利信息
申请号: 201410008696.2 申请日: 2014-01-08
公开(公告)号: CN104762243A 公开(公告)日: 2015-07-08
发明(设计)人: 薛燕芬;陶勇;马延和 申请(专利权)人: 中国科学院微生物研究所
主分类号: C12N1/21 分类号: C12N1/21;C12N15/70;C12N9/42;C12R1/19
代理公司: 北京润平知识产权代理有限公司 11283 代理人: 李婉婉;张苗
地址: 100101 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 重组 菌株 制备 碱性 甘露 聚糖 方法
【权利要求书】:

1.一种重组菌株,其特征在于,该重组菌株为含有编码碱性β-甘露聚糖酶的基因的重组大肠杆菌,且所述基因的碱基序列如SEQ ID NO:1所示。

2.根据权利要求1所述的重组菌株,其中,所述重组菌株的出发菌株为大肠杆菌BW25113。

3.根据权利要求1或2所述的重组菌株,其中,所述重组菌株含有表达载体,所述表达载体为在pBAD载体的NcoI酶切位点和XhoI酶切位点之间插入碱基序列如SEQ ID NO:1所示的基因而得到的表达载体。

4.根据权利要求3所述的重组菌株,其中,所述表达载体中的启动子为阿拉伯糖诱导型启动子。

5.一种制备碱性β-甘露聚糖酶的方法,其特征在于,该方法包括将权利要求1-4中任意一项所述的重组菌株接种至液体发酵培养基中进行发酵,获得含有碱性β-甘露聚糖酶的发酵液。

6.根据权利要求5所述的方法,其中,所述发酵的方式为:在35-38℃下,将所述重组菌株培养至发酵液的OD600值达45-55,然后,在28-32℃下,往发酵液中添加阿拉伯糖,继续发酵8-35h。

7.根据权利要求6所述的方法,其中,在继续发酵过程中,控制发酵体系中的溶氧量为30-50%。

8.根据权利要求6所述的方法,其中,所述阿拉伯糖的添加量为1.5-2.5g/L发酵液。

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