[发明专利]一种重组菌株与制备碱性β-甘露聚糖酶的方法在审
申请号: | 201410008696.2 | 申请日: | 2014-01-08 |
公开(公告)号: | CN104762243A | 公开(公告)日: | 2015-07-08 |
发明(设计)人: | 薛燕芬;陶勇;马延和 | 申请(专利权)人: | 中国科学院微生物研究所 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/70;C12N9/42;C12R1/19 |
代理公司: | 北京润平知识产权代理有限公司 11283 | 代理人: | 李婉婉;张苗 |
地址: | 100101 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 重组 菌株 制备 碱性 甘露 聚糖 方法 | ||
1.一种重组菌株,其特征在于,该重组菌株为含有编码碱性β-甘露聚糖酶的基因的重组大肠杆菌,且所述基因的碱基序列如SEQ ID NO:1所示。
2.根据权利要求1所述的重组菌株,其中,所述重组菌株的出发菌株为大肠杆菌BW25113。
3.根据权利要求1或2所述的重组菌株,其中,所述重组菌株含有表达载体,所述表达载体为在pBAD载体的NcoI酶切位点和XhoI酶切位点之间插入碱基序列如SEQ ID NO:1所示的基因而得到的表达载体。
4.根据权利要求3所述的重组菌株,其中,所述表达载体中的启动子为阿拉伯糖诱导型启动子。
5.一种制备碱性β-甘露聚糖酶的方法,其特征在于,该方法包括将权利要求1-4中任意一项所述的重组菌株接种至液体发酵培养基中进行发酵,获得含有碱性β-甘露聚糖酶的发酵液。
6.根据权利要求5所述的方法,其中,所述发酵的方式为:在35-38℃下,将所述重组菌株培养至发酵液的OD600值达45-55,然后,在28-32℃下,往发酵液中添加阿拉伯糖,继续发酵8-35h。
7.根据权利要求6所述的方法,其中,在继续发酵过程中,控制发酵体系中的溶氧量为30-50%。
8.根据权利要求6所述的方法,其中,所述阿拉伯糖的添加量为1.5-2.5g/L发酵液。
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