[发明专利]一种从黄乳海参提取制备高品质胶原蛋白的方法在审
申请号: | 201410009988.8 | 申请日: | 2014-01-09 |
公开(公告)号: | CN103740795A | 公开(公告)日: | 2014-04-23 |
发明(设计)人: | 李鹏程;李荣锋;于华华;刘松;邢荣娥;薛伟;岳洋 | 申请(专利权)人: | 中国科学院海洋研究所 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K14/78;C07K1/14 |
代理公司: | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人: | 周秀梅;李颖 |
地址: | 266071*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 海参 提取 制备 品质 胶原 蛋白 方法 | ||
1.一种从黄乳海参提取制备高品质胶原蛋白的方法,其特征在于:将去除内脏、破壁后的海参于提取液中搅拌离心得到胶原纤维沉淀;胶原纤维沉淀中经NaOH搅拌调节至中性,而后酶解2-4天,酶解液离心,收集上清液并向其中加入终浓度为1-1.5M的NaCl,过夜离心,沉淀于0.5M HAc中溶解,透析处理后即为黄乳海参胶原蛋白。
2.按权利要求1所述的从黄乳海参提取制备高品质胶原蛋白的方法,其特征在于:将去除内脏的海参体壁切成碎块浸泡于10-30倍(w/v)蒸馏水中,搅拌0.5-2h后弃洗涤液,向浸泡后的海参体壁碎块中加入其10-30倍体积的提取液中搅拌12-36h,弃洗涤液,然后向海参碎块中加入其10-30倍体积的蒸馏水搅拌提取12-36h,用筛绢滤去未溶解海参碎块,10000-12000g离心10-30min得胶原纤维沉淀;
所述提取液为含5mM EDTA的0.1M pH8.0Tris-HCl。
3.按权利要求1所述的从黄乳海参提取制备高品质胶原蛋白的方法,其特征在于:向所述的胶原纤维沉淀中加入其10-30倍体积的0.1M NaOH搅拌2-4天,搅拌后以10000-12000g离心10-30min得沉淀,用蒸馏水洗涤沉淀至中性,然后向沉淀中加入其10-30倍体积的含0.5-1%(w/v)的胃蛋白酶的0.5M HAc,酶解2-4天。
4.按权利要求1所述的从黄乳海参提取制备高品质胶原蛋白的方法,其特征在于:将所述酶解液以10000-12000g离心10-30min,取上清,并向上清中加入NaCl使其终浓度为1-1.5M,4℃静置过夜,10000-12000g离心10-30min,取沉淀;沉淀溶解于0.5M HAc中,溶解后4℃下用20mM pH8.0PBS透析1-3天,透析后10000-12000g离心10-30min,收集沉淀;沉淀再溶于0.5M HAc中,溶解后4℃下用0.5M HAc透析1-3天,然后冷冻干燥后即为黄乳海参胶原蛋白。
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