[发明专利]中药桑杜糖免疫增强剂及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药桑杜糖免疫增强剂，由桑叶多糖和杜仲多糖组成，简称桑杜糖増免剂，属于畜禽免疫佐剂领域。

背景技术

动物的病毒性传染病，如高致病性禽流感、新城疫、传染性法氏囊病等，严重危害畜牧业的发展，造成严重的经济损失，一直受到世界的广泛关注。免疫接种是防控这些疫病暴发的最好措施。然而单独接种疫苗通常产生相对较弱的免疫力。免疫佐剂能增强疫苗的免疫应答，使保护时间延长。许多免疫佐剂如弗氏佐剂和脂多糖因易引起全身性反应（如恶心，发热，过敏反应，嗜酸性粒细胞增多，中毒，麻痹以及自身免疫性疾病）和局部炎症反应（炎症，疼痛，肿胀，坏死，溃疡和脓肿）而限制了其广泛应用。因此，研制高效安全的新型免疫佐剂成为防控动物传染病的热点。许多中药证明具有免疫增强作用，且高效安全。但大多数组方复杂，给药不便。随着集约化养殖业的发展，动物群体饮水给药具有更明显的优势。本发明，进行了组分药筛选、方剂筛选和剂量筛选，结合便于应用等方面综合比较，研制成功由桑叶多糖和杜仲多糖制成的桑杜糖増免剂。

发明内容

本发明针对当前动物疫病防控现有技术中急需高效、安全的免疫增强剂或疫苗佐剂的问题，提供一种由桑叶多糖和杜仲多糖制成的新型中药免疫增强剂。

本发明一种新型中药免疫增强剂，其特征在于，每1000ml药液由桑叶150g和杜仲皮145g制成。药液中的桑叶多糖含量不低于0.2%，杜仲多糖的含量不低于0.1%。

生产每1000mL药液的工艺流程为：桑叶水煎2次，合并滤液，醇沉后干燥，640mL水溶解；杜仲乙醇脱脂后，水煎2次，合并滤液，醇沉后干燥，360mL水溶解。两种溶液混匀，分装，即得。

桑叶多糖的提取工艺为桑叶加30倍质量水煎煮2次，第一次1.5小时，第二次1小时。杜仲多糖的提取工艺为杜仲皮加4倍质量无水乙醇回流脱脂2次，后水煎2次，第一次1.5小时，第二次1小时。

有益效果：本发明的基础工作，首先选择有免疫增强作用的中药多糖，比较它们的增强免疫作用，筛选出作用较好的桑叶多糖、杜仲多糖，按不同比例组成多个复方，通过系列试验比较，证明复方的效果强于单味药，筛选出效果最好的组方配比（表1）。

本领域的技术人员可以通过正交试验确定了桑叶多糖和杜仲多糖的提取条件，优化多糖溶解性条件，确定了桑杜糖増免剂的生产工艺。

与现有技术相比，本发明优点如下：

1.与化学佐剂相比，桑杜糖増免剂效果可靠，且来源于天然中药，无毒副作用，无药残隐患，保障动物源食品安全；生产对环境无污染，符合绿色环保的要求。

2.与传统中药方剂相比，桑杜糖増免剂处方精炼，成分明确，工艺简化，质量可控，给药方便，成本较低。

3.与同类中药成分方剂相比，桑杜糖増免剂功效提高，配合新城疫疫苗免疫雏鸡，能显著增强细胞免疫和体液免疫，提高疫苗的免疫应答。

具体实施方式

1.制备工艺

（1）桑叶多糖的制备以提取物中的桑叶多糖得率为指标，对加水量、提取时间、提取次数、醇沉用乙醇浓度进行正交试验，确定桑叶多糖的最佳提取工艺为加30倍水，煎煮2次，第一次1.5h，第二次1h。取桑叶150g，按以上工艺水煎，合并滤液，加入95%乙醇使醇含量达75%，静置12h，沉淀65℃干燥，640mL水溶解，得桑叶多糖水溶液。

（2）杜仲多糖的制备以提取物中的桑叶多糖得率为指标，对脱脂乙醇量、加水量、提取时间、提取次数进行正交试验，确定杜仲多糖的最佳提取工艺为加4倍质量95%乙醇回流脱脂2次，加20倍水，煎煮2次，第一次1.5h，第二次1h。取杜仲皮145g，按以上工艺脱脂，水煎，合并滤液，加入95%乙醇使醇含量达75%，静置12h，沉淀65℃干燥，360mL水溶解，得桑叶多糖水溶液。

（3）药液制备将桑叶多糖溶液和杜仲多糖溶液混合，分装。用苯酚-硫酸法测定多糖含量，HPLC法测定芦丁和松脂醇二葡萄糖苷的含量。药液中多糖含量不低于0.3%、芦丁含量不低于0.025%，松脂醇二葡萄糖苷不低于0.01%。

2.增强免疫效果比较

（1）体外增强免疫效果