[发明专利]一种苯甲酸衍生物的制备方法

说明书

技术领域

本发明属医药化工领域，涉及一种苯甲酸衍生物的制备方法。更具体的说，涉及一种对氨甲基苯甲酸或对氯甲基苯甲酸的制备方法。

背景技术

氨甲苯酸（对氨甲基苯甲酸）又名止血芳酸或PAMBA，白色鳞片状或结晶粉末。它是抗纤维蛋白溶解的促凝血药，其止血机理与对氨甲基环己酸相同，止血效果较对氨甲基环己酸强4～5倍；对一般慢性渗血的止血效果特别显著，可用于肺、肝、胰、前列腺、甲状腺、肾上腺等手术时的异常出血，紫癜、白血病、肺结核咯血等，也可用于链激酶或尿激酶过量引起的出血。

经文献检索，现有技术中报道的氨甲苯酸的合成方法可概括为以下三种：

一种是对氰基苯甲酸加氢。如文献Journal of Organic Chemistry,24,115-116;1959和文献Collection of Czechoslovak Chemical Communication,34(3),1108-10;1969分别介绍了以雷尼钴或雷尼镍为催化剂，经氢气还原得到产品氨甲苯酸。该合成路线需要使用氢气，反应压力较高，在生产上存在安全隐患，危险性较大。

第二种是对氯甲基苯甲酸或对溴甲基苯甲酸胺化。如《全国原料药工艺汇编》中记录，在氨水和碳酸铵（碳酸氢铵）的存在下，对氯甲基苯甲酸或对溴甲基苯甲酸胺化制备氨甲苯酸。该方法副产物多，收率低，反应后处理需分解除去未反应的碳酸铵，会有大量的氨气和二氧化碳溢出，且对氯甲基苯甲酸或对溴甲基苯甲酸的制备都会使用氯气或溴素，对环境污染严重。

第三种是对氰基氯苄水解再胺化。如CN201202718673介绍了一种以对氰基氯苄为原料，经过酸水解得到对氯甲基苯甲酸、再胺化的方法制备氨甲苯酸。该方法胺化步骤虽采用乌洛托品为催化剂，氨化母液可套用，但酸水解步骤产生大量废酸、废水，氨化步骤后处理繁琐，对pH值控制也要求苛刻，整条工艺不适合工业化生产。

上述现有技术中的方法制备对氨甲基苯甲酸时都不可避免存在一些问题，因此，本领域需要一种全新的制备对氨甲基苯甲酸的方法。

发明内容

利用腈水解酶，可以克服化学法生产氨甲苯酸的缺陷。生物催化是一种高效的催化体系，它可以催化得到许多传统化学方法不能或者不易合成得到的手性化合物，显示出优良的化学选择性、区域选择性和立体选择性；而且，生物转化反应条件温和，反应产物纯度高、容易分离和纯化。生物催化在医药化工中间体的生产中已显示出巨大的发展潜力。

因此，本发明提供一种苯甲酸衍生物的制备方法，包括在包含腈水解酶的酶催化剂作用下，含水反应混合物中的苯甲腈衍生物水解生成所述苯甲酸衍生物。本发明的一个具体实施方式中，所述苯甲腈衍生物为对氨甲基苯甲腈和/或对氯甲基苯甲腈。

在一种具体的实施方式中，所述腈水解酶为GenBank中编号为ABD98457.1的氨基酸序列；或者是在保持或提高所述腈水解酶活性的前提下，插入、缺失或替换ABD98457.1氨基酸序列中的一个或数个氨基酸所获得的氨基酸序列，或在ABD98457.1氨基酸序列的基础上加入标签或多肽等常规方法进行修饰而得到的氨基酸序列，或由基因库中搜索或常规突变方法得到的与ABD98457.1氨基酸序列相似度在80%以上的氨基酸序列。本领域技术人员公知的，所述ABD98457.1中共含369个氨基酸残基，且所述ABD98457.1由GenBank中编号为DQ444267.1的核苷酸序列翻译而得，所述DQ444267.1中共含1775个核苷酸。

本发明的发明人筛选和对比了多种腈水解酶催化对氨甲基苯甲腈生成对氨甲基苯甲酸，发现使用ABD98457.1为腈水解酶时对本发明中苯甲酸衍生物的制备特别有利，进而使得酶法工业生产相应的苯甲酸衍生物变得可行。