[发明专利]小叶榕气生根总黄酮提取纯化方法

说明书

技术领域

本发明属于一种提取纯化小叶榕气生根总黄酮的方法。

背景技术

榕树须为桑科榕属植物小叶榕Ficus microcarpa L.f.的气生根，主产于广东、江西、云南、广西等地。其味苦性平，具有祛风清热，活血散瘀，解毒之功效，民间用于治疗流感、百日咳、麻疹不透、扁桃体炎、眼结膜炎、痧气腹痛、风湿骨痛、鼻衄、血淋、跌打损伤等。临床治疗效果良好，受到广大患者好评。研究表明^[1~8]，榕树中含有黄酮、三萜类、酸性树脂和甾体化合物等。其中黄酮类等有效成分对治疗冠心病、老年性痴呆、脑血栓、神经系统疾病和消除自由基、抗炎、抑菌、抗癌等方面有显著效果，无毒副作用，并以此开发出多种药品和保健食品。当前国内外对于榕树须中黄酮类化合物的研究还相对匮乏，对其水提物中总黄酮的提取研究报道少之又少。

发明内容

本研究系统考察榕树须总黄酮提取，为开发广西优势资源药材提供依据，为实际生产中榕须水提物质量控制标准的建立提供一份可靠的参考，公开了一种小叶榕气生根总黄酮提取纯化方法。

本发明以如下技术方案解决上述技术问题：

提取纯化方法为：

（1）       取小叶榕气生根，加入8-15倍量水（V/W）超声提取1-2h，提取1-3次；将提取液浓缩至浸膏；

（2）       将浸膏按照1:20~1:100(g/ml)溶于去离子水中，用醋酸水溶液和氢氧化钠水溶液调节pH至3~5，减压抽滤除去不容成分；

（3）       进行膜过滤，合并溶液并浓缩至干；膜材料为聚丙烯中空纤维、陶瓷复合膜或聚四佛乙烯膜，膜孔径为0.05μm~0.5μm；

（4）       上大孔吸附树脂动态吸附，用乙醇-水组合洗脱；大孔吸附树脂是DM130、AB-8、D101或DM301；大孔吸附树脂与吸附液用量之比为1:10-1:100g/ml；

（5）       收集各段洗脱液，减压浓缩，得高含量黄酮的浸膏。

膜分离技术是采用陶瓷复合膜和聚丙烯中空纤维膜等对不同分子量大小的物质进行分离。原料也从循环罐中由泵输送到膜组件后，由于膜的孔径使得化合物分离；大孔吸附树脂明显的好处是不需要复杂的设备，处理方法简单，树脂可再生，对环境造成的危害小，制备的成本低，方法易推广。

本发明采用膜分离除去水提物中的杂质后，能够显著提高大孔吸附的效率，从而提高整体纯化效率。

本发明所得的浸膏，为黑色黏稠状固体，总黄酮含量大于65%，高于只采用膜分离或只采用大孔吸附树脂单一技术得到的总黄酮含量。且生产成本低，安全无毒副作用，为工业化生产提供了必要的条件，将使医药企业获得显著的经济效益和社会效益。

具体实施方式

实施例1

称取200g药材，加入8倍量水（V/W）超声提取1，提取1次，将提取液浓缩至浸膏，总黄酮含量10.71mg/g。

实施例2

    取200g药材，15倍量水（V/W）超声提取1h，提取3次，将提取液浓缩至浸膏，总黄酮含量11.41mg/g。

实施例3

取200g药材，12倍量水（V/W）超声提取2h，提取3次，将提取液浓缩至浸膏，总黄酮含量12.31mg/g。

 

实施例4

将实施例1所得的浸膏，按1:20溶于去例子水中，用醋酸水溶液和氢氧化钠水溶液调节pH至3，减压抽滤除去不容成分，利用孔径为0.05μm聚丙烯中空纤维膜进行膜分离，将过膜后的滤液浓缩至干；

称取干膏2.5g，定容至50ml，装于含5g MD130柱中，用50ml水洗脱后，再用50ml50%乙醇洗脱，收集50%洗脱液，浓缩，即得，总黄酮含量为66%。

    称取干膏2.5g，定容至50ml，装于含5g AB-8柱中，用50ml水洗脱后，再用50ml50%乙醇洗脱，收集50%洗脱液，浓缩，即得，总黄酮含量为65%。

 

实施例5

取实施例3所得浸膏，按1:100(g/ml)溶于去离子水中，用醋酸水溶液和氢氧化钠水溶液调节pH至5，减压抽滤除去不容成分，利用孔径为0.5μm的陶瓷复合膜进行膜分离，将过膜后的滤液浓缩至干；

称取干膏2.5g，定容至50ml，装于含0.5g D101柱中，用10ml水洗脱后，再用50ml 95%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩，即得，总黄酮含量为69%。

称取干膏2.5g，定容至50ml，装于含3g DM301柱中，用20ml水洗脱后，再用50ml 95%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩，即得，总黄酮含量为71%。