[发明专利]一种用于生产多黏菌素B的发酵培养基及其制备方法和用途有效
申请号: | 201410014183.2 | 申请日: | 2014-01-13 |
公开(公告)号: | CN104774892B | 公开(公告)日: | 2018-11-30 |
发明(设计)人: | 马川川;那可;赵文杰;魏晓东;刘永双;张守雨 | 申请(专利权)人: | 上海医药工业研究院;中国医药工业研究总院 |
主分类号: | C12P21/04 | 分类号: | C12P21/04;C12R1/12;C12R1/01 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 张睿 |
地址: | 200040 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 生产 菌素 发酵 培养基 及其 制备 方法 用途 | ||
本发明公开了一种用于生产多黏菌素B的发酵培养基及其制备方法和用途。以培养基的总重量计,所述的培养基含有0.1‑1.5w/w%有机氮源、5.0‑15.0w/w%全麦粉和0.3‑1.2w/w%无机盐。
技术领域
本发明涉及生物技术领域;尤其涉及一种发酵培养基及其制备方法和用途。
背景技术
多黏菌素B(Polymyxin B,PMB)是由多黏芽孢杆菌或多黏类芽孢杆菌产生的一种的碱性环肽类抗生素,具有良好的抗革兰氏阴性菌活性。多黏菌素B的药品包括硫酸多黏菌素B注射剂以及硫酸多黏菌素B与其他抗生素的复方外用制剂,用来治疗革兰氏阴性菌引起的皮肤创面、腹膜炎、泌尿系统以及呼吸系统等部位的感染;PMB还可以显著抑制内毒素诱导的急性期反应,因此也可用于败血症。
目前多黏菌素B的制备采用发酵法,多黏芽孢杆菌或多黏类芽孢杆菌经过种子培养后,接种在发酵罐中培养并产生多黏菌素B,再经后续的分离纯化得到高纯度的产品。发酵培养过程中培养基配方对产量有很大的影响。现有报道涉及的相关培养基配方存在发酵产量不高的问题。
因此,本领域迫切需要提供一种高产多黏菌素B的发酵培养基。
发明内容
本发明旨在提供一种发酵培养基。
本发明的另一个目的是提供上述发酵培养基的制备方法。
本发明的再一个目的是提供上述发酵培养基的用途。
在本发明的第一方面,提供了一种用于生产多黏菌素B的发酵培养基,以培养基的总重量计,所述的培养基含有0.1-1.5w/w%有机氮源、5.0-15.0w/w%全麦粉和0.3-1.2w/w%无机盐。
在另一优选例中,所述的有机氮源选自下述的一种或一种以上:蛋白胨、酵母抽提物、黄豆粉或玉米浆粉;更佳地,所述有机氮源选自黄豆粉或玉米浆粉。
所述无机盐选自下述的一种或一种以上:磷酸二氢钾、硫酸铵、硫酸镁、硫酸锌或碳酸钙;更佳地,所述无机盐为硫酸铵或硫酸铵和选自下述的一种或一种以上物质的混合:磷酸二氢钾、硫酸镁、硫酸锌或碳酸钙。
在另一优选例中,所述全麦粉的含量为7.0-13.0w/w%。
在本发明的第二方面,提供了一种如上所述的本发明提供的发酵培养基的制备方法,所述的方法包括步骤:
(1)以培养基的总重量计,将0.1-1.5w/w%有机氮源、5.0-15.0w/w%全麦粉和0.3-1.2w/w%无机盐混合得到混合物1;
(2)将淀粉酶作用于经糊化或未经糊化的混合物1(优选糊化),得到如上所述的本发明提供的发酵培养基。
在另一优选例中,所述淀粉酶选自α-淀粉酶、β-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶或异淀粉酶;更优选α-淀粉酶。
在另一优选例中,以全麦粉的重量计,所述淀粉酶的用量为2-1500U/g;更优选为2-1000U/g。
在另一优选例中,所述淀粉酶的作用温度为50-80℃。
在另一优选例中,所述淀粉酶的作用时间为2-40分钟;更优选为5-20分钟。
在本发明的第三方面,提供了一种如上所述的本发明提供的发酵培养基的用途,用于培养多黏芽孢杆菌(Bacillus polymyxa)或多黏类芽孢杆菌(Paenibacilluspolymyxa)以生产多黏菌素B。
据此,本发明提供了一种使发酵产物多黏菌素B产量高的发酵培养基。
具体实施方式
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