[发明专利]一种用液相色谱法分离测定依折麦布中间体有关物质的方法

说明书

技术领域

 本发明属于分析化学领域，具体涉及液相色谱法分离测定依折麦布中间体及其有关物质的方法。

背景技术

依折麦布是胆固醇抑制吸收剂，为处方药。可单独或与HMG-CoA还原酶抑制剂（他汀类）联合应用于治疗原发性（杂合子家族性或非家族性）高胆固醇血症，可降低总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白；还适用于纯合子家族性高胆固醇血症和纯合子谷甾醇血症(或植物甾醇血症）。依折麦布中间体化学名为(3R,4R)-4-(4-(benzyloxy)phenyl)-1-(4-fluorophenyl)-3-((S)-3-(4-fluorophenyl)-3-hydroxypropyl)azetidin-2-one，分子式为C₃₁H₂₇F₂NO₃。依折麦布中间体结构式为：

在合成该化合物的过程中，有几步重要的中间体可能会由于去除不完全而影响药物的纯度和质量，对于依折麦布中间体的合成主要控制的有关物质有4个，分别是有关物质1：3-[2-(4-Benzyloxy-phenyl)-1-(4-fluoro-phenyl)-4-oxo-azetidin-3-yl]-propionic acid methyl ester）、有关物质2：3-[2-(4-Benzyloxy-phenyl)-1-(4-fluoro-phenyl)-4-oxo-azetidin-3-yl]-propionic acid）、有关物质3：（3R,4S）-4-(4-(Benzyloxy)phenyl)-1-(4-fluorophenyl)-3-(3(4-fluorophenyl)-3-oxopropyl)azetidin-2-one，结构式分别为：

   

对于合成依折麦布中间体中引入的杂质，在原料药中需进行质量控制，因此，实现依折麦布中间体及其有关物质的分离，在依折麦布的合成及其质量控制方面具有重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分析依折麦布中间体化学纯度以及分离其有关物质的方法，从而实现依折麦布中间体与其有关物质的分离和测定，保证依折麦布及含依折麦布质量控制。

本发明所述的用液相色谱法分析依折麦布中间体化学纯度以及分离其有关物质的方法，是采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以一定比例的酸水溶液－有机相为流动相。

上述所说的色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，选自Kromasil-C₁₈或Alltima-C₁₈。

上述所说的有机相选自以下化合物：甲醇、乙腈、丙醇、异丙醇，优选为甲醇。

上述所说的方法中，酸水溶液中包含的酸选自磷酸、甲酸、碳酸、柠檬酸，优选为磷酸。

其中酸水溶液pH为2.0~4.0，优选3.0。

本发明所述的分离测定方法，可按照以下方法实现：

1) 取依折麦布中间体样品适量，用甲醇或流动相溶解样品，配制成每1mL含依折麦布0.1～1.5mg的样品溶液。

2) 设置流动相流速为0.5～1.5mL/min ，流动相流速优选为1.0mL/min，检测波长为210～280nm，最佳检测波长为230nm。 

3) 取1)的样品溶液10～50μL，注入液相色谱仪，完成依折麦布中间体与有关物质的分离测定。其中：

高效液相色谱仪的型号，无特别要求，本发明采用的色谱仪为岛津：

LC-20AT， CBM-20A，SIL-20AC，SPD-M20A，CTO-10ASvp 

色谱柱：C₁₈（Kromasil，250×4.6 mm，5μm）

流动相： 磷酸水（pH3.0）-甲醇（20:80）

流速：1.0 mL/min

检测波长：230 nm

进样体积：10μL

本发明采用C₁₈（Kromasil，250×4.6 mm，5μm），能够有效的分离依折麦布中间体及其有关物质。本发明解决了依折麦布及其有关物质的分离测定问题，从而确保了依折麦布中间体原料药的质量可控（结果见附图1～7）。 

附图说明

图1为实施例1时的依折麦布中间体及其有关物质HPLC图；

图2为实施例1时依折麦布中间体HPLC图；

图3为实施例2时的依折麦布中间体及其有关物质HPLC图；