[发明专利]用于毒性检测生物传感器的生物膜的制备方法及其应用有效
申请号: | 201410020376.9 | 申请日: | 2014-01-16 |
公开(公告)号: | CN103789295A | 公开(公告)日: | 2014-05-14 |
发明(设计)人: | 崔荣;刘伶俐;王虔祖;程辉;韩京龙 | 申请(专利权)人: | 烟台大学 |
主分类号: | C12N11/10 | 分类号: | C12N11/10;C12N11/08;C12N11/04;G01N27/28 |
代理公司: | 北京轻创知识产权代理有限公司 11212 | 代理人: | 杨立 |
地址: | 264005 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 毒性 检测 生物 传感器 生物膜 制备 方法 及其 应用 | ||
1.一种用于毒性检测生物传感器的生物膜的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)取污水处理厂的活性污泥在培养基上接种,采用更代培养、连续曝气的方式进行培养,得到菌液;
(2)将聚乙烯醇和海藻酸钠加入到蒸馏水中,其中聚乙烯醇的质量浓度为8~15g/L,海藻酸钠的质量浓度为2~4g/L,水浴加热0.5h,在电动搅拌机的搅拌下,使其完全溶解,随后冷却至常温,得到聚乙烯醇凝胶;
(3)将步骤(1)得到的菌液,经高速冷冻离心机在7000rpm/min下离心10min后,倒掉上清液,取得到的沉淀物与步骤(2)得到的聚乙烯醇凝胶以重量比1:4混合,再利用表面皿将混合物均匀涂成膜状;
(4)在20~25℃条件下,将步骤(3)得到的膜状混合物干燥0.5~2h,使其成膜后,将膜放入预先配制好的交联固化溶液中,交联固化1~2h,取出固化完成的膜,即得到用于毒性检测生物传感器的生物膜。
2.根据权利要求1所述用于毒性检测生物传感器的生物膜的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中活性污泥的悬浮固体量为10248mg/L。
3.根据权利要求1所述用于毒性检测生物传感器的生物膜的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)培养基的成分的组成为:葡萄糖:1000mg/L,NH4CO3:538.6mg/L,K2HPO4:17.86mg/L,MgCl2·6H2O:14.29mg/L,MnSO4·4H2O:2.143mg/L,CuSO4·5H2O:0.7143mg/L,CaCl2·6H2O:0.01786mg/L,FeSO4·7H2O:3.571mg/L。
4.根据权利要求1或3所述用于毒性检测生物传感器的生物膜的制备方法,其特征在于,所述培养基氨氮浓度为95mgN/L。
5.根据权利要求1所述用于毒性检测生物传感器的生物膜的制备方法,其特征在于,所述步骤(4)中交联固化溶液为H3BO3和CaCl2的混合溶液,其中,H3BO3的质量浓度为4g/L,CaCl2的质量浓度为1g/L。
6.一种如权利要求1至5任一项所述用于毒性检测生物传感器的生物膜在制作用于毒性检测的生物传感器上的应用。
7.一种采用如权利要求1至5任一项所述用于毒性检测生物传感器的生物膜制作出的用于毒性检测的生物传感器。
8.一种采用如权利要求7所述用于毒性检测生物传感器的制备方法,其特征在于,所述制备方法的具体步骤为:将如权利要求1至5任一项所述用于毒性检测生物传感器的生物膜紧贴于溶解氧电极的聚四氟乙烯膜上,并用固定套固定,组装成生物传感器。
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