[发明专利]免疫球蛋白K轻链基因增强子抑制蛋白多肽治疗急性炎症药物中应用

说明书

技术领域

本发明涉及免疫球蛋白K轻链基因增强子抑制蛋白多肽及其应用，具体涉及具有促进免疫球蛋白K轻链基因增强子抑制蛋白、具有减轻急性炎症反应对机体破坏的多肽。 

背景技术

脓毒血症(sepsis)一直是一个严重的医学问题。早期脓毒血症不经过及时有效治疗可进展为重症脓毒血症和脓毒血症性休克，两者死亡率分别为20%～30%和40%～70% 。医学界一直在研究有效的治疗手段，如早期对症治疗、激活蛋白C、皮质激素治疗等。近年来随着医学研究的深入，对脓毒血症的认识和治疗取得了很大进展。其中，免疫球蛋白K轻链基因增强子抑制蛋白(IKB-α)在内毒素休克中扮演着重要角色。 

IKB蛋白家族成员有IKBα(MAD-3，pp40)、IKBβ、IKBγ/p105、IKBδ/p100、IKBε、Bcl-3以及果蝇属的Cactus等。其家族结构特点是均有多个约33个氨基酸的重复序列，称为崐SWI6/锚蛋白重复序列，主要参与与Rel蛋白的RHD相互作用。IKB蛋白主要有以下三个部分构成：1.与蛋白降解有关的N-末端区； 2.能与NF-κB相互作用的内部区（区内含有锚蛋白重复序列ANK）（家族共有结构）主要参与与Rel蛋白的RHD相互作用； 3.称为PEST的C－端区，主要参与“囚禁”NF-κB在细胞浆中。IKBs家族参与两个信号通路: NF-κB和Toll-like Receptor信号通路。NF-κB的激活必须通过两个步骤：①IKB从NF-κB复 合体中解离并降解，暴露NF-κB的核定位序列； ②NF-κB发生核易位，并与特异的κB序列结合。 

因此，IKB通过介导这两条通路，从而调控前炎症性细胞因子、细胞表面受体、转录因子、粘附分子等的生成。最终产生抗炎的作用。因而成为治疗中性粒细胞为主的炎症反应的主要靶点。尽管如此，并没有成熟开发的免疫球蛋白K轻链基因增强子抑制蛋白多肽抑制剂问世，用于治疗脓毒血症。 

发明内容

发明目的

    本发明提供全新的序列，该序列为免疫球蛋白K轻链基因增强子抑制蛋白多肽，对急性炎症具有很好的疗效。

技术方案

    免疫球蛋白K轻链基因增强子抑制蛋白多肽4，其特征在于其序列为EDDGYHSKSM。

免疫球蛋白K轻链基因增强子抑制蛋白多肽4在治疗急性炎症药物中的应用。 

有益效果

利用固相合成法化学合成免疫球蛋白K轻链基因增强子抑制蛋白多肽4，该多肽具有全新的序列，该多肽可体外促进免疫球蛋白K轻链基因增强子抑制蛋白活力。在内毒素休克模型实验中成功的增加了小鼠的生存率。单核巨噬细胞表达肿瘤坏死因子释放酶，这种酶可切割并释放肿瘤坏死因子，肿瘤坏死因子是炎症反应的核心细胞因子，有加重炎症反应的作用。我们发现的多肽抑制剂可以抑制肿瘤坏死因子释放酶的酶活力，从而减轻了炎症反应，保护机体并减轻炎症的破坏作用。

具体实施方式

实施例1 

多肽抑制剂体外靶点酶：肿瘤坏死因子释放酶(均购于sigma公司)的IC50值。

肿瘤坏死因子释放酶的活力是通过切割荧光产生底物Mca-Pro-Leu-Ala-Gln-Ala-Val-Dpa-Arg-Ser-Ser-Ser-Arg-NH检测的(激发波长=320 nm， 发射波长=405 nm)。反应在37°C下100 μl反应体系中进行。反应开始时向反应体系中加4 μl 基质金属蛋白酶-3存储液 (1 ng/μl)底物的终浓度为10 μM。测得的IC50值为37.32μmol。 

实施例2 

用内毒素休克模型检测多肽的体内活力