[发明专利]一种嗜热碱性重组含锰过氧化氢酶及其表达载体和工程菌有效
| 申请号： | 201410023123.7 | 申请日： | 2014-01-17 |
| 公开（公告）号： | CN103725699A | 公开（公告）日： | 2014-04-16 |
| 发明（设计）人： | 赵志军;史吉平;孙俊孙;何晓娟 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海高等研究院 |
| 主分类号： | C12N15/53 | 分类号： | C12N15/53;C12N9/08;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 上海光华专利事务所 31219 | 代理人： | 张艳 |
| 地址： | 201210 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 碱性 重组 过氧化氢酶 及其 表达 载体 工程 | ||
1.一种重组含锰过氧化氢酶的多核苷酸，其序列如SEQ ID No：1所示。
2.一种重组含锰过氧化氢酶，由权利要求1所述的多核苷酸序列编码。
3.一种重组含锰过氧化氢酶表达载体，包含如权利要求1所述的重组含锰过氧化氢酶的多核苷酸序列。
4.如权利要求3所述的重组含锰过氧化氢酶表达载体，其特征在于，所述表达载体为pET系列表达载体。
5.如权利要求4所述的重组含锰过氧化氢酶表达载体，其特征在于，所述pET系列表达载体为pET28a(+)。
6.一种工程菌，所述工程菌由权利要求3-5任一权利要求所述的重组含锰过氧化氢酶表达载体转化获得。
7.如权利要求6所述的工程菌，其特征在于，所述工程菌由权利要求3-5任一权利要求所述的重组含锰过氧化氢酶表达载体转化大肠杆菌获得。
8.如权利要求7所述的工程菌，其特征在于，所述大肠杆菌为大肠杆菌BL21(DE3)。
9.一种重组含锰过氧化氢酶的制备方法，包括如下步骤：将权利要求6-8任一权利要求所述的工程菌在LB培养基中活化过夜后，转接至TB培养基中，添加MnCl2和IPTG，再诱导培养。
10.一种工程菌，所述工程菌由权利要求3-5任一权利要求所述的重组含锰过氧化氢酶表达载体和锰离子转运蛋白Mnt H表达载体转化获得。
11.如权利要求10所述的工程菌，其特征在于，所述锰离子转运蛋白Mnt H表达载体采用pACYCDuet-1。
12.如权利要求10所述的工程菌，其特征在于，所述工程菌由权利要求3-5任一权利要求所述的重组含锰过氧化氢酶表达载体和锰离子转运蛋白Mnt H表达载体转化大肠杆菌获得。
13.如权利要求12所述的工程菌，其特征在于，所述大肠杆菌为大肠杆菌BL21(DE3)。
14.一种重组含锰过氧化氢酶的制备方法，包括如下步骤：将权利要求10-13任一权利要求所述的工程菌在LB培养基中活化过夜后，转接至含有Kan和Cm的TB培养基中，添加IPTG，同时添加MnCl2，再诱导培养。
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