[发明专利]含抗氧化酶的黄孢原毛平革菌提取液和制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及抗氧化组合物技术领域，具体是涉及到一种含抗氧化酶的黄孢原毛平革菌提取液和制备方法。 

背景技术

活性氧是微生物生长代谢过程不可避免的产物，细胞内最常见的活性氧包括超氧自由基（O₂^·-）、过氧化氢（H₂O₂）以及羟自由基（·OH）。在正常情况下，低水平的活性氧（ROS）是细胞行使生物学功能所必需的，因为ROS可参与细胞内许多重要途径的信号转导调控。但在某些特殊的情况下，比如细胞自身氧化还原代谢紊乱或外界离子辐射等原因就会造成细胞内ROS的大量积聚。由于自由基高度的活泼性与极强的氧化反应能力，能通过氧化作用来攻击其所遇到的任何分子，这种过量的ROS可以攻击蛋白质、脂质及DNA，细胞内自由基的积累还会引起膜脂过氧化，使机体内大分子物质产生过氧化变性，交联或断裂，从而引起细胞结构和功能的破坏，导致细胞损伤。

在正常的生理情况下，体内自由基不断产生，同时细胞自身有自由基清除系统，可及时清除代谢产生的自由基而免受伤害，使之维持在一个正常的生理水平上。但在逆境下，比如重金属胁迫条件下，一方面自由基产生过多，另一方面自由基清除系统会发生紊乱，从而使细胞受到伤害。大量研究已经证实，细胞内本身就具有清除多余自由基的能力，这主要是靠内源性自由基清除系统。 

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种高效抗氧化的含抗氧化酶的黄孢原毛平革菌提取液和制备方法。

为解决上述技术问题，本发明提供一种含抗氧化酶的黄孢原毛平革菌提取液，以黄孢原毛平革菌菌体为被提取物，以磷酸盐缓冲液为提取剂，将黄孢原毛平革菌菌体和磷酸盐缓冲液混合，研磨，离心分离，得到含抗氧化酶的黄孢原毛平革菌提取液，所述含抗氧化酶的黄孢原毛平革菌提取液中包含超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶，每10 ml含抗氧化酶的黄孢原毛平革菌提取液中，所述超氧化物歧化酶的活性为15～33U，所述谷胱甘肽过氧化物酶的活性为31～61 U，所述过氧化氢酶的活性为20～81 U。

黄孢原毛平革菌为黄孢原毛平革菌BKMF-1767，保藏号为CCTCC AF96007，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国.武汉.武汉大学。

所述黄孢原毛平革菌菌体的制备方法为，将黄孢原毛平革菌在30～35℃下培养3～5天，超纯水清洗。

所述含抗氧化酶的黄孢原毛平革菌提取液为1ml时，使用的所述黄孢原毛平革菌菌体的质量为10～100 mg。黄孢原毛平革菌体质量和含抗氧化酶的黄孢原毛平革菌提取液的体积配比表示为黄孢原毛平革菌菌体浓度。

所述磷酸盐缓冲液为磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液，浓度为50mM，pH值为7。

本发明还提供一种含抗氧化酶的黄孢原毛平革菌提取液的制备方法，步骤是，称取黄孢原毛平革菌菌体，转移至玻璃匀浆器中，加入磷酸盐缓冲液，充分研磨，离心，得上清液；再加入磷酸盐缓冲液至玻璃匀浆器中，充分研磨，离心，得上清液；合并上述上清液，在合并后的上清液中加入磷酸盐缓冲液定容。

本发明的有益效果是，

1、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，简称SOD) 是重要的活性氧防护酶，广泛存在于各类生物体中，能催化生物体内超氧自由基(O₂^·-)发生歧化反应，是机体内O₂^·-的天然消除剂，维持机体中自由基产生和清除的动态平衡，对机体细胞起保护作用，SOD将O₂^·-歧化成 H₂O₂，再由CAT和过氧化物酶（POD）将H₂O₂分解成 H₂O和O₂。SOD的活性和含量也在一定程度上反映了机体清除氧自由基的能力，对其进行准确测定，具有重要意义。

2、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶。GSH-Px催化还原型谷胱甘肽氧化与H₂O₂还原反应，生成氧化型谷胱甘肽（GSSG），阻断由脂氢过氧化物(LOOH) 引发自由基的二级反应，减少LOOH对生物体的损害，从而保护细胞膜的结构及功能不受活性氧的干扰及损害。