[发明专利]薄皮甜瓜中果肉蛋白质组分析方法有效
| 申请号： | 201410026620.2 | 申请日： | 2014-01-21 |
| 公开（公告）号： | CN103760210A | 公开（公告）日： | 2014-04-30 |
| 发明（设计）人： | 郝敬虹;黄雅芳;房克凤;杨瑞;刘超杰;韩莹琰;杨柳;王建立;张卿;宋婷婷;孙中华;于同泉;王绍辉;范双喜 | 申请（专利权）人： | 北京农学院 |
| 主分类号： | G01N27/447 | 分类号： | G01N27/447;G01N1/28 |
| 代理公司： | 北京中恒高博知识产权代理有限公司 11249 | 代理人： | 张秋云 |
| 地址： | 100000 北京市昌平区回*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 甜瓜 果肉 蛋白质 组分 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种薄皮甜瓜中果肉蛋白质组分析方法，其特征在于：是将薄皮甜瓜中果肉总蛋白质提取后，首先进行等电聚焦电泳，再进行SDS-PAGE凝胶垂直电泳。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述薄皮甜瓜蛋白质提取是将薄皮甜瓜中果肉用Tris提取液/Tris-饱和酚提取，用含乙酸铵的甲醇溶液沉淀得到的。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：每1g薄皮甜瓜中果肉需要3~4 ml Tris提取液和3~4 ml Tris-饱和酚。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述Tris提取液和Tris-饱和酚的体积比为1：1。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述等电聚焦电泳中使用24cm胶条。
6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述等电聚焦电泳中上样量为800μg蛋白质，终上样体积为450μl。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述等电聚焦电泳后包括胶条平衡的步骤，所述胶条平衡分两步，每步20min。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在所述SDS-PAGE凝胶垂直电泳中，先1W /块跑1h，琼脂糖形成一条直线后，调成5W/块跑8h。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述SDS-PAGE凝胶垂直电泳后包括固定、染色、脱色的步骤，在固定后用纯水清洗，所述染色时间为24小时。
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