[发明专利]一种艾塞那肽的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种艾塞那肽的纯化方法。

技术背景

艾塞那肽是一种合成的肠降血糖素类似物(有抗高血糖作用的肽)，其53%的氨基酸顺序与哺乳动物胰高血糖素样多肽-1(GLP-1)的氨基酸顺序相同。具有促进胰岛素分泌、增加胰岛素敏感性及改善胰岛细胞功能的作用，是极具前景的治疗糖尿病的药物。本发明采用制备高效液相色谱法对艾塞那肽粗品分离纯化，并冷冻干燥，制备艾塞那肽纯品。

发明内容

本发明的目的在于针对目前在纯化艾塞那肽等多肽物质的过程中所存在的时间长以及纯度不高的问题，提供一种采用制备液相色谱系统纯化高纯度艾塞那肽的新方法，该方法包括以下步骤：

a.将艾塞那肽溶于水后进行过滤，一般将艾塞那肽配制成饱和溶液，具体实施时，可根据实际溶解效果进行调整；

b.取配制好的艾塞那肽溶液，用填充好固定相填料的动态轴向压缩柱进行分离，收集艾塞那肽对应谱带的馏分；

c.将步骤b中收集的对应谱带洗脱液中的溶剂冻干，即可得到色谱纯为98%的艾塞那肽。

本发明的有益效果是可直接采用合成后的艾塞那肽粗品来制备，不需要大量的前处理过程，简单、易控制，工艺技术简化，适用于大规模制备。高效液相色谱测定中，纯度高于98%，完全可用于药物的开发。

具体实施方式

实施例1

1.取1g艾塞那肽粗品溶于水，配制成饱和溶液，置于过滤装置中，过滤除去固体颗粒；

2.将艾塞那肽溶液泵入动态轴向压缩柱制备色谱系统，柱填充尺寸为Φ50×250mm，填料为十八烷基硅胶，粒径为10um，上样量1g，流动相的体积比为20:80~40:60梯度洗脱120min，当艾塞那肽洗脱完毕后，流动相切换成高比例乙腈，将后端杂质冲出，一个分离周期结束，采用的紫外可见光度检测器的检测波长为214nm，收集保留时间在30~45min的馏分，经HPLC分析纯度≥98.5%。

实施例2

1.取1.5g艾塞那肽粗品溶于水，配制成饱和溶液，置于过滤装置中，过滤除去固体颗粒；

2.将艾塞那肽溶液泵入动态轴向压缩柱制备色谱系统，柱填充尺寸为Φ50×250mm，填料为十八烷基硅胶，粒径为10um，上样量1.5g，流动相的体积比为25:75~40:60梯度洗脱120min，当艾塞那肽洗脱完毕后，流动相切换成高比例乙腈，将后端杂质冲出，一个分离周期结束，采用的紫外可见光度检测器的检测波长为214nm，收集保留时间在42~50min的馏分，经HPLC分析纯度≥98.3%。

实施例3

1.取2.5g艾塞那肽粗品溶于水，配制成饱和溶液，置于过滤装置中，过滤除去固体颗粒；

2.将艾塞那肽溶液泵入动态轴向压缩柱制备色谱系统，柱填充尺寸为Φ150×250mm，填料为十八烷基硅胶，粒径为10um，上样量2.5g；流动相的体积比为25:75~45:55梯度洗脱150min，当艾塞那肽洗脱完毕后，流动相切换成高比例乙腈，将后端杂质冲出，一个分离周期结束，采用的紫外可见光度检测器的检测波长为214nm，收集保留时间在51~59min的馏分，经HPLC分析纯度≥98.2%。