[发明专利]猪SAMHD1基因、蛋白、单克隆抗体及其应用

说明书

本发明公开了一种猪SAMHD1基因，该基因序列包含编码SEQIDNO.1所示氨基酸序列的核苷酸序列。本发明还公开了猪SAMHD1蛋白质，该蛋白质具有SEQIDNO.1所示氨基酸序列。本发明还公开了抗猪SAMHD1蛋白的单克隆抗体。本发明的猪SAMHD1基因、蛋白质，具有抗病毒活性，适于研制抗病毒药物，应用前景广阔。本发明的单克隆抗体，与猪SAMHD1蛋白具有很好的特异性反应，为进一步研究猪SAMHD1蛋白的生物学功能奠定了重要的基础。

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，尤其涉及一种猪SAMHD1基因、蛋白、单克隆抗体及其应用。

背景技术

先天性免疫在机体抵抗病原感染过程中发挥重要作用，其在病原入侵机体后能够做出快速的应答，控制病原的扩散，进而诱导特异性免疫应答来消除病原。机体在长期进化的过程中，形成了具有抵抗病原入侵的天然限制性因子。目前已经发现4种天然限制性因子，TRIM5α、Tetherin、APOBEC3G和SAMHD1(Neil et al.,2008；Sheehy et al.,2002；Stremlau et al.,2004)。最近研究证实，SAMHD1作为一种天然限制性因子，在髓源细胞中表达量较高，能够阻止HIV-1型病毒在髓源细胞中的复制(Chen et al.,2012；Goldstoneet al.,2011；Laguette et al.,2011)。SAMHD1蛋白能够调控机体的先天性免疫，明显上调机体抗病毒免疫应答，介导由干扰素引起的炎症反应，参与宿主对侵入病原的防御体系。然而，目前SAMHD1的生物学特性还知之甚少。最近研究表明，SAMHD1蛋白具有脱氧核苷三磷酸水解酶的功能，可以水解细胞内的dNTP，从而抑制HIV-1病毒的反转录和cDNA的形成过程，进而阻止病毒的感染与复制(Franzolin et al.,2013；Goldstone et al.,2011)。而HIV-2和某些猴免疫缺陷病毒(SIVsm/mac)则能够通过其编码的Vpx蛋白降解SAMHD1，Vpx蛋白与DCAF1相互作用，进而形成Cullin4A/DDB1和E3泛素-连接酶复合体，通过泛素-连接酶复合体靶向降解SAMHD1蛋白，从而导致病毒对该类细胞的感染，这种降解作用可以通过蛋白酶抑制剂来解除(Ahn et al.,2012；Hrecka et al.,2011；Srivastava et al.,2008)。除HIV外，是否有其他病毒能够与其相互作用并不清楚。此外，SAMHD1蛋白还与Aicardi-Goutieres(ASG)疾病相关(Rice et al.,2009)。

SAMHD1蛋白是否能够拮抗其他病毒的感染，目前并不十分清楚。近几年来，猪瘟病毒(CSFV)、高致病性蓝耳病病毒(HP-PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)等猪重大疫病病毒一直危害我国养猪业的健康、持续发展。如何防控重大疫病的发生，降低其造成的损失，提高畜禽机体抗病毒反应，是科研人员致力追求的目标。SAMHD1作为天然免疫限制性因子，其功能和特性目前知之甚少。因此，对其开展功能与特性研究，对防控重大疫病的发生与发展具有重要意义。

对于SAMHD1蛋白功能的研究，需要获得其全基因序列、重组蛋白以及具有良好反应性的单克隆抗体。目前，人、猴、马等SAMHD1已经获得其全基因序列，但无准确的猪SAMHD1全基因序列，并且人源SAMHD1制备的单抗或者多抗与猪SAMHD1蛋白反应性很差，几乎没有反应性。因此，需要获得准确的猪SAMHD1的全基因序列，并制备具有良好反应性的单克隆抗体，可以实现对SAMHD1蛋白功能更深入的研究。

发明内容

本发明要解决目前没有准确的猪SAMHD1全基因序列的技术问题，提供一种猪SAMHD1基因，该基因的全基因序列可用于研制防控猪重大疫病的药物或生物制品。

为此，还需要提供一种猪SAMHD1蛋白和单克隆抗体，用于制备防治猪重大疫病的药物或生物制品。

为了解决上述技术问题，本发明通过如下技术方案实现: