[发明专利]一种小球藻膏的制备方法

说明书

技术领域

    本发明涉及一种小球藻膏的制备方法，特别是涉及一种基于过滤、浓缩、离心的小球藻膏的制备方法，属于活体微藻浓缩纯化领域。

背景技术

小球藻（Chlorella）为绿藻门小球藻属普生性单细胞绿藻，是一种球形单细胞淡水藻类，直径3～8微米，是地球上最早的生命之一，出现在20多亿年前，基因始终没有变化，是一种高效的光合植物，以光合自养生长繁殖，分布极广。常见的小球藻有蛋白核小球藻、盐生小球藻、眼点小球藻、卵形小球藻和海生小球藻。以似孢繁殖是小球藻属中种类的惟一生殖类型。

小球藻含有丰富的蛋白质、维生素、矿物质、食物纤维、核酸及叶绿素等，是维持和促进人体健康所不可缺少的营养素，特别是含有令人注目的生物活性物质糖蛋白、多糖体以及高达13%的核酸等物质。具有增强人体免疫、防止病毒增殖、抑制癌细胞增殖、抑制血糖上升，降低血清胆固醇含量，排除毒素，迅速修复机体的损伤等功能。

由于小球藻含有丰富的营养物质，因此用途广泛，常被用在以下方面：

1）营养添加剂--提供高含量的蛋白质、叶绿素、维生素、矿物质、核酸；

2）作为食用色素提取物；

3）饲料-鱼虾开口饵料；

4）化妆品原料。

随着养殖技术的不断改进，传统的养殖模式下池塘投药量大，养殖品种的规格小且有药物残留，通过小球藻的应用，可以很好的改进养殖方法，减少药物的使用，形成一种绿色生态养殖模式，减少养殖成本，提高产量，增加养殖户的经济收入。

小球藻在养殖中的主要作用：

1）提供饵料作用

小球藻含有丰富的蛋白质以干重计可达50%左右，是生产蛋白质的良好藻类而且含有维生素，生物多糖，不饱和脂肪酸，叶绿素，类胡萝卜素，是虾苗、蟹苗贝类、鱼苗最好的天然饵料，而且小球藻蛋白质中的天然免疫物质和促生长物质，是配合饲料无法达到的。

2）调水作用

随着水温的不断升高，水体在酸性条件下容易爆发蓝藻，容易给虾蟹带来危害。在养殖过程中使用小球藻，使其在水体中起主导作用，则可有效抑制蓝藻的发生，减小养殖风险。

3）解毒作用

小球藻对增加水体溶氧，降解水中氨氮、H₂S、亚硝酸盐等毒素，有特殊功效。

在重金属污染的环境下，藻类能够被诱导产生一种植物螯合的金属结合蛋白和金属硫蛋白MT，这两种蛋白靠多肽结合有毒的金属离子解毒。

4）增加水中溶氧

小球藻的光合作用是其他植物的数十倍，即摄取太阳能的力量非凡，被誉为“灌装的太阳”，是已知光合作用最强的生物之一。所以小球藻对于池塘中的溶氧具有重要的作用。

基于小球藻的广泛上述重要作用，市场上对小球藻的需求量较大，因此需要对小球藻进行浓缩分离，制得活体小球藻膏，便于使用，在做为养殖饵料，可以节省开支，降低风险，避免养殖户因受气候或其它因素影响，藻水密度稀或培养失败而造成一切费用和时间的浪费。但微藻的收集和纯化制约了微藻培养大规模放大及其工业化应用。目前微藻的收集方法主要包括：磁性分离、絮凝、气浮等。

中国专利CN102277300A公开了一种小球藻磁性分离方法，所述方法包括：使Fe₃O₄纳米颗粒分散形成稳定的悬浮液；在小球藻培养液中加入所述悬浮液，搅拌后经磁分离获得小球藻与磁性介质的聚合物；所述聚合物经洗涤后，加入盐酸反应，结束后微滤、洗涤并收集滤液。

中国专利CN101095459A公开了一种利用絮凝法浓缩海洋微藻的方法，其向微藻培养液中加入壳聚糖的有机酸水溶液，使微藻培养液中壳聚糖的浓度为0.3~8.0mg/L，然后调节微藻培养液的pH值为4.5~8.5，使微藻絮凝，并采用静止分层或气浮方法收集絮凝物。

采用明矾做絮凝剂浓缩小球藻时，小球藻液颜色发黄，沉淀的小球藻分散性差，细胞变性，说明明矾对小球藻的毒害作用较大，并降低了小球藻的营养价值。一般情况下，采用絮凝方法分离和收集微藻需要使用各种磁性分离介质，而磁性分离介质与微藻分离困难，容易造成目标产物的污染。

气浮分离在微藻中应用时通常需要磁性分离介质或表面活性剂的辅助，因此存在和絮凝方法同样的问题。

发明内容

本发明提供一种小球藻膏的制备方法，克服现有小球藻浓缩方法存在的浓缩效率低，容易造成小球藻污染，破坏小球藻营养物质等缺点。

本发明采用如下技术方案：

一种小球藻膏的制备方法包括以下步骤： 

（1）    过滤