[发明专利]一种鉴定红鳍东方鲀亲子关系的分子标记方法及其微卫星与试剂盒有效

专利信息
申请号: 201410033662.9 申请日: 2014-01-24
公开(公告)号: CN103866004A 公开(公告)日: 2014-06-18
发明(设计)人: 刘永新;周勤;张红涛 申请(专利权)人: 中国水产科学研究院;中国水产科学研究院北戴河中心实验站
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/11
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 100141 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 鉴定 东方 亲子关系 分子 标记 方法 及其 卫星 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种鉴定红鳍东方纯亲子关系的微卫星引物,其特征在于,所述引物针对红鳍东方纯基因组的不同连锁群。 

2.根据权利要求1所述的微卫星引物,其特征在于,所述引物选自如下引物对中的3-10对: 

3.根据权利要求1或2所述的微卫星引物,其特征在于,所述引物由如下引物对组成: 

名称 正向引物DNA序列(5′-3′) 反向引物DNA序列(5′-3′) f1360 ggacttcagctctggtcctg ggtgcgactgcttccatcta f1407 caaagacgttcacccacaga accgtctctgcctttgacag

f333 tgtcctctggacctgtgttg ctcccacacatgaagacacg f1752 ggatgtggaacaatctgctt gctgaagtcattcatgggaag f1077 ctgaaagggaaaagcagcaa cacgtcagaagctgcgaRa

4.一种鉴定红鳍东方纯亲子关系的试剂盒,其特征在于,包括权利要求1-3中任一项所述的鉴定红鳍东方纯亲子关系的微卫星引物。 

5.一种鉴定红鳍东方纯亲子关系的分子标记方法其特征在于采用以下步骤: 

(1)选择表1中44对特异微卫星引物进行PCR反应; 

(2)采集不同家系亲本和子代个体的鳍条,提取基因组DNA; 

(3)用步骤(2)的基因组DNA为模板,步骤(1)所选择的44对微卫星引物进行PCR扩增; 

(4)对步骤(3)的PCR产物用扩增产物经8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,硝酸银染色、显色后,凝胶在HP scanjet G4010扫描仪成像; 

(5)将PCR的电泳检测结果数字化处理,用遗传分析软件进行分析; 

(6)获得每个微卫星标记的排除率,统计3-10个标记的累积排除率;利用排除率前5位的标记组合使用,完成家系子代与亲本的亲子关系鉴定; 

(7)利用亲本与子代的亲子关系,就能将不同红鳍东方纯家系区分开来。 

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