[发明专利]一种微生态肥在审
申请号: | 201410034894.6 | 申请日: | 2014-01-23 |
公开(公告)号: | CN104805028A | 公开(公告)日: | 2015-07-29 |
发明(设计)人: | 李政;张健飞;巩继贤;汪丽粉 | 申请(专利权)人: | 天津工业大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/14;C12R1/125;C12R1/685;C12R1/25 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 300160*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生态 | ||
1.一种微生态肥,其特征在于,所述微生态肥的重量份数组成为:解磷巨大芽孢杆菌菌剂1-5份,枯草芽孢杆菌培养物16-25份,黑曲霉培养物10-18份,植物乳杆菌剂5-12份。所述枯草芽孢杆菌保藏编号CGMCC No.7926,所述黑曲霉保藏号CGMCC No.7927。
2.根据权利要求1所述的一种微生物肥,其特征在于,所述枯草芽孢杆菌培养物的制备方法如下:
(1)一级种子培养:将枯草芽孢杆菌斜面菌种接入500毫升摇瓶中,培养基装量100毫升,旋转式摇床180转/分,培养温度30℃,培养时间24小时;
(2)二级种子培养:将一级种子按照10%的接种量接入500毫升二级种子摇瓶中,培养条件与一级种子相同;
(3)三级种子培养:将二级种子以10%接种量接入5000毫升三级种子摇瓶中,培养基装量1000毫升,旋转式摇床100转/分,培养温度30℃,培养时间24小时;
(4)一级种子罐培养:将三级种子以10%接种量接入总容积为150L的一级种子罐,发酵培养基装量100L,培养温度28℃,搅拌速度100转/分,通风量(V/V)1∶0.5,罐压0.05MPa,培养时间24小时;
(5)发酵培养:将一级种子罐菌种以10%接种量接入总容积为1.5吨二级种子罐,发酵培养基装量1吨,培养条件培养温度28℃,搅拌速度100转/分,通风量(V/V)1∶0.5,罐压0.05MPa,培养时间24小时。
培养基组成:葡萄糖6%,酵母提取物1%,蛋白胨0.2%,CaCO31%,pH6.8。
3.根据权利要求1所述微生态肥,其特征在于,所述黑曲霉培养物制备方法如下。菌种采用固体发酵培养:孢子液接种到固态发酵培养料中,26-33℃培养至菌丝长满培养基,低温流化床干燥,粉碎干燥物;采用常见固态发酵法制备获得。
4.根据权利要求1所述微生态肥,其特征在于,所微生态肥的重量份数组成为:解磷巨大芽抱杆菌菌剂3份,枯草芽孢杆菌培养物20份,黑曲霉培养物15份,植物乳杆菌剂10份。
5.根据权利要求1所述微生态肥,其特征在于,所微生态肥的重量份数组成为:解磷巨大芽抱杆菌菌剂1份,枯草芽孢杆菌培养物25,黑曲霉培养物18,植物乳杆菌剂5份。
6.根据权利要求1所述微生态肥,其特征在于,所微生态肥的重量份数组成为:解磷巨大芽抱杆菌菌剂5份,枯草芽孢杆菌培养物25,黑曲霉培养物10,植物乳杆菌剂12份。
7.根据权利要求1-6所述高效微生物肥,其特征在于,所属微生态肥的制备方法如下:按照比例将各种菌剂混合,或混合后制粒;所述枯草芽孢杆菌培养物的制备方法如下:发酵液的获得:采用斜面菌种逐级扩培获得枯草芽孢杆菌发酵液;
(1)一级种子培养:将枯草芽孢杆菌斜面菌种接入500毫升摇瓶中,培养基装量100毫升,旋转式摇床180转/分,培养温度30℃,培养时间24小时;
(2)二级种子培养:将一级种子按照10%的接种量接入500毫升二级种子摇瓶中,培养条件与一级种子相同;
(3)三级种子培养:将二级种子以10%接种量接入5000毫升三级种子摇瓶中,培养基装量1000毫升,旋转式摇床100转/分,培养温度30℃,培养时间24小时;
(4)一级种子罐培养:将三级种子以10%接种量接入总容积为150L的一级种子罐,发酵培养基装量100L,培养温度28℃,搅拌速度100转/分,通风量(V/V)1∶0.5,罐压0.05MPa,培养时间24小时;
(5)发酵培养:将一级种子罐菌种以10%接种量接入总容积为1.5吨二级种子罐,发酵培养基装量1吨,培养条件培养温度28℃,搅拌速度100转/分,通风量(V/V)1∶0.5,罐压0.05MPa,培养时间24小时。
培养基组成:葡萄糖6%,酵母提取物1%,蛋白胨0.2%,CaCO31%,pH6.8;
所述黑曲霉培养物制备方法如下:菌种培养,固体发酵培养:孢子液接种到固态发酵培养料中,26-33℃培养至菌丝长满培养料,低温流化床干燥,粉碎干燥物;采用常见同态发酵法制备获得;
所述植物乳杆菌剂的制备方法:
常规种子发酵培养方法获得种子液;
发酵罐培养:将一级种子罐菌种以5%接种量接入总容积为3吨罐,发酵培养基装量2吨,培养条件培养温度28℃,罐压0.05Mpa,培养时间22小时。发酵完毕发酵液经低温负压真空浓缩到原体积的45%,得到菌浓缩液;添加载体:向浓缩液中添加混合好的载体,混合均匀;浓缩液与载体的重量比为0.5∶1,载体组成为:CaCO325份,糊精12份;流化床干燥,干燥温度50℃;
培养基组成为:酪蛋白胨1%,牛肉提取物1%,酵母提取物0.5%,葡萄糖0.5%,乙酸钠0.5%,柠檬酸二胺0.2%,Tween800.1%,磷酸氢二钾0.2%,七水硫酸镁0.02%,一水硫酸锰0.005%,碳酸钙2%,琼脂1.5%,pH6.8;
植物乳杆菌菌种为CICC20261。
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