[发明专利]一种应用于普那霉素分离的吸附剂的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种树脂吸附剂的制备方法，特别是一种应用于普那霉素分离的吸附剂的制备方法。

背景技术

普那霉素(又称原始霉素)属链阳性菌素类抗生素，分子式C₄₅H₅₄N₈O₁₀，系始旋链霉菌产生，由普那霉素I(PIA，PIB，PIC)和普那霉素II(PIIA，PIIB)组成，两者的组合比例大约是由约30％的普那霉素I(PI)和约70％的普那霉素II(PII)，普那霉素I为环六肽内酯，普那霉素II为多不饱和环内酯，其中PIA和PIIA是普那霉素的主要组分。二者组合比例大约是30％的普那霉素I和70％的普那霉素II。普那霉素主要用于治疗由革兰氏阳性菌包括耐药菌引起的感染。普那霉素经过化学修饰得到的水溶性衍生物喹奴普丁／达福普丁对耐药性革兰氏阳性菌具有很强的杀菌作用，且有较长的抗生素后效应和不易产生耐药性等优点，是目前治疗由耐药的革兰氏阳性菌引起的感染最有效的抗生素之一。

普那霉素IA的分子骨架是由1个3-羟基吡啶羧酸残基和L-苏氨酸、D-氨基丁酸、L-脯氨酸、4-二甲基氨基-L-苯丙氨酸、4-酮-L-六氢吡啶羧酸和L-苯甘氨酸等6个氨基酸残基聚合而成的环状结构。PIA大环的第5位的L-DMPAPA残基被4-甲基氨基-L-苯丙氨酸残基替换就形成PIB，而PIB的第3位D-氨基丁酸残基被D-丙胺酸残基替换后又形成PIC分子。

US3154475公开了普那霉素的传统提取方法。发酵液调PH至3，过滤分离得到滤液，用稀碱调滤液PH至7，然后用有机溶剂二氯甲烷直接萃取滤液，得到含有目的物的萃取液，真空浓缩，用石油醚处理即得到普那霉素粗品，粗品用二氯甲烷溶解，上粉末状活性炭柱层析，二氯甲烷洗脱，收集中央部分，石油醚处理得到沉淀，洗涤干燥后得到纯品，提取总收率约50％。该提取方法存在以下缺点：溶剂消耗量大，且乳化严重，不利于操作，总收率低，不适用规模化生产。

CN1311069公开了原始旋链霉菌CGMCC0957，用其生产原始霉素。本发明还涉及生产原始霉素的方法，即在培养基中以适宜的条件培养始旋链霉菌CGMCC0957，高效生产原始霉素的方法。精制溶解于二氯甲烷中，过滤，滤液进装填颗粒活性炭的柱，用二氯甲烷冲洗，收集中央部分，浓缩液过滤，滤液用石油醚处理，得到沉淀，洗涤干燥后得到纯品。该提取方法存在以下缺点：溶剂消耗量大，总收率低，不适用规模化生产。

CN102558302公开了一种分离纯化普那霉素的方法，属于生物技术领域。该方法的主要步骤为：吸附树脂洗脱、纳滤浓缩、溶媒结晶、浓缩干燥后获得普那霉素成品。

CN102465164公开了一种普那霉素的制备方法，发酵液经酸化后，固液分离得到滤液；滤液经大孔树脂脱色；脱色液用大孔吸附树脂富集后解析；解析液再用活性炭脱色后浓缩、萃取、碱洗；结晶，碱洗液结晶得到普那霉素粗品；粗品再经过重结晶得到普那霉素精粉。

目前文献中所报道的分离纯化方法收率较低，不能以足够稳定和可重现的质量进行批量生产。由于市售的吸附树脂与普那霉素相容性差，吸附能力收到限制，所以需要发明一种新型的吸附树脂，提高对普那霉素的吸附能力。

发明内容

目的在于针对从普那霉素发酵液分离纯化普那霉素对吸附分离材料的要求，提供一种应用于普那霉素分离的吸附剂的制备方法，同时公开其制备方法。

在反应釜中，打入纯水，加入一定量的分散剂，引发剂，苯乙烯／交联剂单体／吡啶-4-丙烯酸／丙烯酸六氟丁酯，致孔剂等，升温至反应温度，待反应结束.烘干，抽提致孔剂，烘干收袋.本发明在聚合中引入少量吡啶-4-丙烯酸作为共聚单体，以提高树脂与含有吡啶基羧酸结构的雷帕霉素的相容性，从而提高了雷帕霉素的收率；丙烯酸六氟丁酯的加入赋予树脂骨架地耐高温，酸碱腐蚀的能力.

本发明提供一种应用于普那霉素分离的吸附剂的制备方法，同时公开其制备方法。通过以下步骤实现：

步骤1.水相的配制

按重量份计，在压力反应釜中内加入100份纯水0.5-2份有机化学分散剂(优选0.5份)，搅拌均匀；

所述化学分散剂选自聚乙烯醇、明胶或羟甲基纤维素等。

步骤2.油相的配制

按重量份计，将100份苯乙烯、30-100份(优选50份)二乙烯基苯、3-10份(优选5份)吡啶-4-丙烯酸，3-10份(优选5份)丙烯酸六氟丁酯混合，再加入0.5-3份过氧化物引发剂(优选2份)、10-40份致孔剂，搅拌均匀；

步骤3.悬浮聚合反应