[发明专利]串联表达的siRNA及其在治疗慢性淋巴细胞白血病中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及医学领域，更具体地，涉及一种串联表达针对BTK的siRNA的方法、串联表达的siRNA及其在治疗慢性淋巴细胞白血病中的应用。

背景技术

慢性淋巴细胞白血病(chronic lymphocytic leukemia，CLL)，简称慢淋，是一种进展较缓慢的成熟B淋巴细胞增殖性疾病。

一半以上的CLL病例13q14纯合性或杂合性丢失，是CLL最常见的染色体异常，特征是机体的淋巴细胞在体内异常增生和积蓄伴有免疫功能低下。CLL多见于中老年人，50岁以上占90%，男性易患。CLL起病隐袭，临床特征多样，可呈现惰性或侵袭性，患者存活时间从1年到15年以上不等，其发病机理尚不十分明确。

目前，对慢性淋巴细胞白血病预后因素的认识还不十分明确，使得患者不能像急性白血病患者那样根据预后风险选择相应的治疗手段。对于患者来说，即使是预后最差者其预期生存期也有数年。

在治疗时考虑的因素包括疾病进展、临床症状、肿瘤负荷、年龄、并发症、不利预后因素和治疗对生存期的影响等。目前，除了造血干细胞移植外，对于CLL尚无有效的治疗手段。典型的医院治疗慢性粒细胞白血病的方法主要采用化疗、放疗、干扰素治疗、骨髓移植等方法，但是治疗效果都不是很理想，并不能改变本病的自然进程。

因此，本领域迫切需要开发新的有效治疗CLL的方法和药物。

发明内容

本发明的目的是提供一种可用于治疗CLL的方法以及相应的药物。

在本发明的第一方面，提供了一种重组的用于抑制酪氨酸激酶的核酸序列，所述的核酸序列的结构如式V所示：

A-(B-L-)p-Z    (式V)

式中，

A为任选的5'端的序列(较佳地长度为0-50bp，更佳地0-20bp，最佳地0-10bp)；

B为相同或不同的、特异性抑制酪氨酸激酶的siRNA序列，或者用于产生所述siRNA序列的前体RNA序列；

L为任选的间隔序列(较佳地长度为0-50bp，更佳地0-20bp，最佳地0-10bp)；

p为1、2、3、4或5的正整数；

Z为任选的5'端的序列(较佳地长度为0-50bp，更佳地0-20bp，最佳地0-10bp)。

在另一优选例中,所述的核苷酸序列包括DNA序列和RNA序列。

在另一优选例中,所述的B是序列选自SEQ ID NO.:1、2或3的siRNA、或用于产生所述siRNA的前体RNA。

在另一优选例中，所述的重组的用于抑制酪氨酸激酶的核酸序列是选自下组的一种或多种活性成分：

(a).抑制酪氨酸激酶的siRNA，其中所述的siRNA包括序列如SEQ ID NO.:1-3所述的siRNA序列；

(b).前体RNA，所述的前体RNA能在宿主内加工成(a)中所述的抑制酪氨酸激酶的siRNA；

(c).多核苷酸，所述的多核苷酸能被宿主转录形成(b)中所述的前体RNA，并加工形成(a)中所述的siRNA；

(d).表达载体，所述表达载体含有(a)中所述的抑制酪氨酸激酶的siRNA、或(b)中所述的前体RNA、或(c)中所述的多核苷酸，并且所述式V中，A和Z相连形成环状。

在另一优选例中,所述的核酸序列是串联表达2种或多种不同siRNA序列的核酸序列。

在另一优选例中，所述的“重组的”包括人工合成的。

在另一优选例中，所述的前体RNA能在宿主(如哺乳动物，包括人)内加工成(a)中所述的siRNA。

在本发明的第二方面，提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括药学上可接受的载体和有效量的选自下组的一种或多种活性成分：

(a).抑制酪氨酸激酶的siRNA，其中所述的siRNA包括序列如SEQ ID NO.:1-3中任一所述的siRNA序列；

(b).前体RNA，所述的前体RNA能在宿主内加工成(a)中所述的抑制酪氨酸激酶的siRNA；

(c).多核苷酸，所述的多核苷酸能被宿主转录形成(b)中所述的前体RNA，并加工形成(a)中所述的siRNA；

(d).表达载体，所述表达载体含有(a)中所述的抑制酪氨酸激酶的siRNA、或(b)中所述的前体RNA、或(c)中所述的多核苷酸；和

(e).(a)中所述的siRNA的激动剂。

在另一优选例中,(c)中所述的多核苷酸串联表达相同或不同的所述siRNA。