[发明专利]一种肿瘤标记物及其在制备结直肠癌诊断试剂中的应用

说明书

技术领域

本发明属于基因工程及肿瘤学领域，涉及一种与结直肠癌相关的血清/组织肿瘤标记物及其应用。

背景技术

结肠癌、直肠癌是常见的恶性肿瘤，进展期占大多数，其发病率已居恶性肿瘤的第4位。随着经济发展、生活方式、生活环境及膳食结构的改变，结直肠癌的发病率呈不断上升趋势。虽然结直肠癌的诊断水平有了提高，但早期结直肠癌的检出率仍然较低而死亡率较高。据统计显示，早期结肠癌根治后5年生存率约为80%，而进展期结肠癌术后5年生存率仅为50%。因此，早期诊断是提高结肠癌治愈率的关键因素，寻找敏感性、特异性高的肿瘤标志物成为临床科学研究的重点目标。

血清肿瘤标志物是结肠癌诊断常用方法之一，CEA、CA19-9、CA242等。其中以CEA为主，有40%～70%结肠癌患者中CEA增高。但这些标记物单独作为诊断胰腺癌的指标尚不精确，敏感性较低，并且在其他消化道肿瘤及良性疾病中也有升高，因此对结肠癌早期诊断的价值有限。另外，一些基因肿瘤标志物如p53,k-ras等也用于临床结肠癌的早期诊断，但始终未能达到诊断的目的。因此，寻找敏感性高、特异性强、结果稳定的肿瘤标志物仍是结肠癌早期诊断中亟待解决的问题。

半胱氨酸蛋白酶抑制剂（Cystatins,CSTs）能抑制细胞内外的半胱氨酸蛋白酶，在肿瘤的生长、血管生成、浸润和转移起重要作用，可作为肿瘤诊断和预后估计的标志物。Cystatins最早是由Anastasi等采用亲和层析的方法首次在鸡蛋清中分离得到的对半胱氨酸蛋白酶有抑制作用的一种蛋白质，作为一个半胱氨酸蛋白酶抑制剂的超家族，依据其分子结构主要分成三大类：⑴胞内cystatin也称stefis,包括A和B2个成员；⑵分泌型cystatins,包含有C、D、E/M、F、G、S、Sv和SA等成员；⑶血浆中的激肽原,包含低分子质量和高分子质量激肽原。目前这个家族中，研究较多，并且与恶性肿瘤关系较为明确的主要是CystatinA、B、C和M等。CST1、CST4、CST2均属于Cystatin家族中的II型分泌蛋白，近年来有研究发现，Cyatatin SN在胃癌组织中呈现高表达，并与胃癌细胞的侵袭转移相关。又有研究结果表明，其在直肠癌细胞中和患者血液中有高表达。基于Cystatin家族的功能，将其作为临床肿瘤标记物具有很大的临床应用价值及前景。

发明内容

本发明的首要目的是针对上述技术问题，提出一种与结直肠癌相关的组织肿瘤标记物。

本发明的第二个目的是提供上述组织肿瘤标记物的mRNA引物及抗体。

本发明的第三个目的是提供上述组织肿瘤标记物的mRNA引物及抗体在制备结直肠癌诊断剂中的应用。

本发明的第四个目的在于提供一种检测结直肠/直肠癌的试剂盒。

本发明的目的通过以下技术方案得以实施：

发明提供了一种与结直肠癌相关的组织基因标记物，该标记物为CystatinSN、CystatinS和CystatinSA中的一种或多种的组合。

优选地，所述的标记物为CystatinSN、CystatinS和CystatinSA的组合。

本发明同时提供了CystatinSN、CystatinS和/或CystatinSA在制备结直肠癌诊断试剂或结直肠癌诊断试剂盒中的应用。

更具体地说，本发明提供了CystatinSN、CystatinS和/或CystatinSA检测试剂在制备结直肠癌诊断试剂或结直肠癌诊断试剂盒中的应用。

所述的检测试剂包括检测引物，序列如SEQ ID NO:1和/或SEQ ID NO:2。

或者，所述的检测试剂包括CystatinSN、CystatinS和/或CystatinSA蛋白抗体。

所述的抗体可以通过商品化的途径获得。

发明同时提供给了一种用于诊断结直肠癌的试剂盒，含有CystatinSN、CystatinS和/或CystatinSA基因检测试剂。

或者，用于诊断结直肠癌的试剂盒含有CystatinSN、CystatinS和/或CystatinSA蛋白检测试剂。

或者，用于诊断结直肠癌的试剂盒含有基因检测试剂和蛋白检测试剂中的一种或多种。

更优选地，上述的诊断试剂或诊断试剂盒含有CystatinSN、CystatinS和CystatinSA基因的组合检测试剂；或CystatinSN、CystatinS和CystatinSA蛋白的组合检测试剂。