[发明专利]一种鸭用免疫增强剂及制备方法

权利要求书

1.一种基于鸭IL-8真核表达质粒免疫增强剂，其特征在于：所述免疫增强剂为鸭IL-8真核表达质粒的水溶液，其浓度为0.4mg/mL~0.8mg/mL。

2.根据权利要求1所述的基于鸭IL-8真核表达质粒免疫增强剂，其特征在于：所述的鸭IL-8真核表达质粒含有鸭IL-8基因的编码序列，该基因的长度为312个核苷酸，类型为核苷酸，链性为单链，全长为编码区。

3.一种如权利要求1所述的一种基于鸭IL-8基因真核表达质粒的免疫增强剂的制备方法，其特征在于：它包括以下步骤：

第一，提取鸭RNA；

第二，将获得的目的基因片段连接于pMD-18T载体，构建pMD-18T-IL-8，再转入大肠杆菌DH5α中；

第三，采用PCR方法从pMD-18T-IL-8扩增出IL-8基因，用Xho I + BamH I进行酶切，同法处理真核表达载体pcDNA3.1，然后电泳分离和分别回收目的基因；

第四，采用T4 DNA连接酶将鸭IL-8基因插入真核表达质粒pcDNA3.1中，转化大肠杆菌DH5α，蓝白斑筛选，挑取可疑菌落于LB液体培养基于36℃~38℃培养12~18h，收集菌液采用DNA提取试剂盒提取质粒，用PCR和双酶切鉴定；

第五，取鉴定为阳性重组质粒的大肠杆菌DH5α，于LB液体培养基36℃~38℃培养12~18h后，采用大剂量质粒提取试剂盒提取得到pcDNA3.1-IL-8，即为基于鸭IL-8基因的禽流感疫苗免疫增强剂。