[发明专利]一种玉米挥发物对亚洲玉米螟产卵行为影响的试验方法

说明书

技术领域

本发明属于生物研究领域，尤其涉及一种玉米挥发物对亚洲玉米螟产卵行为影响的试验方法。

背景技术

亚洲玉米螟是一种重要的农业害虫，在我国和东南亚各国发生普遍，其寄主范围很广，寄主植物多达69种，大发生年可使玉米减产30%以上。由于该虫钻蛀性危害的特点，运用常规防治手段，很难达到好的效果。大量研究表明：植食性昆虫对寄主植物的危害都是以探测和识别的选择定向过程开始的，定向行为顺序包括昆虫对远距离植物或者生境的定向、到达植物后对取食或产卵部位的识别和选择、选定植物后对取食或产卵等活动的调节控制。在这一过程中植食性昆虫利用了嗅觉、味觉、视觉和触觉等多种行为模式（Miller and Stricker，1984），而植物释放的特征性的挥发物在此过程中发挥着重要的作用。有研究表明，玉米、胡椒和马铃薯叶片的戊烷溶剂提取物对欧洲玉米螟Ostrinia nubilalis的产卵均有引诱作用（Udayagiri and Mason,1995），蕉藕叶片粗提物对亚洲玉米螟产卵具有很强的引诱作用（张颖等，2010）。当剂量为80μg/cm2时，玉米挥发物的几个组分对欧洲玉米螟的产卵具有不同的影响：法尼烯表现出引诱作用，法尼醛、法尼醇则表现出驱避作用，橙花叔醇、β-石竹烯没有影响（Binder et al.,1995;Binder and Robbins,1997）。当剂量为1mg时，玉米挥发物苯甲醛、苯乙醛、青叶醇和柠檬烯的气味对亚洲玉米螟雌蛾产卵表现出驱避作用（何康来等，2005）。在高浓度下，亚洲玉米螟幼虫危害的玉米植株释放的挥发物组分反-2-己烯醛、顺-3-己烯-1-醇、壬醛对雌蛾产卵表现出驱避作用，法尼烯、β-石竹烯和α-石竹烯则有影响（Huang et al.,2009）。事实上，即使是在玉米螟为害的状态下，玉米释放的挥发物浓度远远达不到这么高的浓度。因此，有必要研究不同浓度的玉米挥发物组分对亚洲玉米螟产卵选择性影响。

发明内容

本发明的目的在于提供一种玉米挥发物对亚洲玉米螟产卵行为影响的试验方法，旨在为研制亚洲玉米螟产卵引诱剂或者驱避剂提供依据，探索新的害虫防治手段。

本发明是这样实现的，一种玉米挥发物对亚洲玉米螟产卵行为影响的试验方法包括以下步骤：

步骤一、亚洲玉米螟在人工气候箱用人工饲料饲养，连续繁殖多代，成虫羽化当天，将雄雌虫按不低于2:1（至少5头雌虫）的比例放在养虫笼中自由交配，并喂以10%的蜂蜜水以补充营养，交配3天后的雌蛾作为实验的供试虫源；

步骤二、选取20种玉米挥发物标准化合物，将每种样品溶于液体石蜡中，在漩涡混合器中充分混合，其中8种化合物配5×10^-3g/ml～5×10^-9g/ml浓度系列（浓度以10倍递减），置于冰箱中保存，以用于产卵选择行为测定；

步骤三、对供试虫源进行产卵生测。

进一步，步骤一中人工气候箱温度为26℃-28℃、相对湿度大于80%，光周期为16L:8D。

进一步，步骤三所述的产卵生测所用的产卵笼是由80目的铁纱网、直径为0.3cm的铁丝和两个直径13cm、高为1cm、底部镂空的圆柱形底座制作而成的高为20cm的圆柱形产卵笼，圆柱形底座内外两面用保鲜膜覆盖，外侧保鲜膜内壁上分别粘贴一片直径为5cm的圆形滤纸片，分别滴加待测化合物和对照溶剂，作为气味室。内侧保鲜膜上用昆虫针均匀的扎30个孔，便于挥发物透过小孔进入，亚洲玉米螟雌蛾喜欢在光滑表面产卵，仅在内侧保鲜膜上面产卵，作为产卵室。

进一步，由于亚洲玉米螟不能与气味室内的化合物直接接触，只能通过嗅觉来感受气味，以其产卵的多少作为对测试气味的产卵选择反应衡量标准。

进一步，步骤三所述的产卵生测的具体方法为：

取200μl待测化合物滴加在一端气味室的滤纸上作为处理端，并在另一端气味室的滤纸片上滴加同样体积的液体石蜡作为对照端，在每个产卵室放置5头雌蛾，实验在22:00之后进行，并于23:00之前将产卵装置放入暗室中，温度为24±1℃、相对湿度≥80%，次日7:00之后分别记录在处理和对照端保鲜膜上所产的卵块数和卵粒数，每个化合物至少重复6次，即至少测定30头雌蛾的产卵量。

效果汇总

本发明测定了8种供试化合物对亚洲玉米螟雌蛾产卵选择的影响，为研制亚洲玉米螟产卵引诱剂或者驱避剂提供了依据，探索了新的害虫防治手段。

附图说明