[发明专利]抗水解的聚丙烯酰胺凝胶在审
申请号: | 201410045971.8 | 申请日: | 2009-09-02 |
公开(公告)号: | CN103897017A | 公开(公告)日: | 2014-07-02 |
发明(设计)人: | C·劳维尔;C·帕纳托尼;T·R·伯克曼;S·凯特;S·彼得森;L·奥列奇;杨雪梅 | 申请(专利权)人: | 生物辐射实验室股份有限公司 |
主分类号: | C07K1/26 | 分类号: | C07K1/26 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 韦东 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 水解 聚丙烯酰胺 凝胶 | ||
1.一种通过电泳分离蛋白质混合物的方法,所述方法包括(i)将所述混合物样品上样于凝胶上,其中所述凝胶包含用含有三乙醇胺的缓冲溶液配制的交联的聚丙烯酰胺,所述凝胶含有约0.03mM-0.3mM的三(羟甲基)氨基甲烷和约0.03M-0.3mM的双(2-羟乙基)氨基-三(羟甲基)甲烷,或所述凝胶含有0.03mM-0.3mM的三(羟甲基)氨基甲烷但不含双(2-羟乙基)氨基-三(羟甲基)甲烷,或所述凝胶含有0.03M-0.3mM的双(2-羟乙基)氨基-三(羟甲基)甲烷但不含有三(羟甲基)氨基甲烷,并且(ii)在所述凝胶上施加电压,使所述蛋白质在所述凝胶中以不同速率迁移,直到在所述凝胶中分离成多个条带,其中,所述凝胶在上述用于上述步骤(i)和(ii)之前已被制备和储存至少3天。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述凝胶在所述步骤(i)和(ii)之前已被制备和储存至少7天。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述凝胶在所述步骤(i)和(ii)之前已被制备和储存至少1个月。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述凝胶在所述步骤(i)和(ii)之前已被制备和储存至少6个月。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述三乙醇胺在所述凝胶中的浓度为约10mM-250mM。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述三(羟甲基)氨基甲烷在所述凝胶中的浓度为约0.03mM到约0.3mM,所述双(2-羟乙基)氨基-三(羟甲基)甲烷在所述凝胶中的浓度为约0.03mM到约0.3mM。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述三(羟甲基)氨基甲烷在所述凝胶中的浓度为约0.03mM到约0.3mM,且所述凝胶不含有双(2-羟乙基)氨基-三(羟甲基)甲烷。
8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述凝胶不含有三(羟甲基)氨基甲烷,且所述双(2-羟乙基)氨基-三(羟甲基)甲烷在所述凝胶中的浓度为约0.03mM到约0.3mM。
9.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述凝胶还包含浓度50mM-500mM的甘氨酸。
10.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述凝胶还包含浓度约50mM-500mM的甘氨酸,以及相对所述甘氨酸比例约20摩尔%-60摩尔%的共轭两性电解质。
11.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述三乙醇胺在所述凝胶中的浓度为约10mM-250mM,并且所述凝胶还包含浓度约50mM-500mM的甘氨酸,相对所述甘氨酸比例为约20摩尔%-60摩尔%的共轭两性电解质,以及浓度约10mM-500mM的弱酸。
12.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述电压为至少约350伏。
13.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述电压为约400-600伏。
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