[发明专利]表达鸡IgY分子Fc片段和禽流感病毒抗原的融合基因及其应用有效
申请号: | 201410046883.X | 申请日: | 2014-02-10 |
公开(公告)号: | CN104830882B | 公开(公告)日: | 2018-02-06 |
发明(设计)人: | 索勋;刘贤勇;秦梅;汤新明;索静霞 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
主分类号: | C12N15/62 | 分类号: | C12N15/62;C12N15/85;C12N15/66;C12N1/11;A61K48/00;A61K35/68;A61P31/16 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 表达 igy 分子 fc 片段 禽流感 病毒 抗原 融合 基因 及其 应用 | ||
1.一种表达鸡IgY分子Fc片段和禽流感病毒抗原蛋白的融合基因,其特征在于,所述融合基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
2.含有权利要求1所述融合基因的载体。
3.根据权利要求2所述的载体,其特征在于,所述载体的构建方法为:利用传统的Trizol法分别提取禽流感病毒H9N2和鸡的总RNA;设计引物分别扩增得到禽流感病毒H9N2亚型的HA1基因片段和鸡IgY分子Fc基因片段;用搭桥PCR方法将HA1基因和Fc基因片段连接形成融合基因HA1-Fc;亚克隆至克隆载体后对测序鉴定正确的HA1-Fc基因用限制性内切酶AgeI、SacII酶切,将其连接至球虫表达载体,得到载体pchFcRn。
4.根据权利要求3所述的载体,其特征在于,所述球虫表达载体为pMDEAAssA。
5.一种转基因球虫的构建方法,其特征在于,将权利要求3或4所述的载体转染和缓艾美耳球虫子孢子,接种至鸡后利用乙胺嘧啶药物进行压力筛选并连续传代得到稳定表达鸡IgY分子Fc片段和禽流感病毒H9N2囊膜蛋白HA1的转基因球虫。
6.根据权利要求5所述的构建方法得到的转基因球虫。
7.权利要求1所述的融合基因在制备禽类抗禽流感病毒药物上的应用。
8.权利要求6所述的转基因球虫在制备禽类抗禽流感病毒药物上的应用。
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